[发明专利]一种大叶种巴戟天组培苗快速繁殖的方法及其应用

权利要求书

1.一种大叶种巴戟天组培苗快速繁殖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将新生的大叶种巴戟天藤茎消毒、漂洗，得到外植体；

S2.将步骤S1得到的外植体接种至腋芽诱导培养基，诱导培养得到腋芽；

S3.将步骤S2得到的腋芽接种至丛生芽诱导培养基中，诱导培养得到丛生芽；

S4.将步骤S3得到的丛生芽接种至生根诱导培养基中，诱导培养丛生芽生根，得到大叶种巴戟天组培苗；

步骤S2中，所述腋芽诱导培养基为含有浓度为0.15～0.25mg/L的6-苄基氨基嘌呤的1/2MS培养基，pH为5.5～6.5；

步骤S3中，所述丛生芽诱导培养基为含有浓度为0.8～1.2mg/L的6-苄基氨基嘌呤、浓度为0.15～0.25mg/L的吲哚-3-丁酸的MS培养基，pH为5.5～6.5；

步骤S4中，所述生根诱导培养基为含有浓度为0.2～0.55mg/L的吲哚-3-丁酸的MS培养基，pH为5.5～6.5。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2～S4中，所述诱导培养的条件为：每天光照11～12小时，光照强度为1100～1200lx，空气温度为20～25℃，湿度为60～70％。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S1中，所述藤茎包括幼嫩茎、半木质化茎及完全木质化茎。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述幼嫩茎的消毒是利用质量百分数0.05～0.15％的氯化汞溶液消毒260～280s；所述半木质化茎及完全木质化茎的消毒是利用质量百分数0.05～0.15％的氯化汞溶液消毒350～370s。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2中，所述腋芽诱导培养基为含有浓度为0.2mg/L的6-苄基氨基嘌呤的1/2MS培养基，pH为6.0。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S3中，所述丛生芽诱导培养基为含有浓度为1mg/L的6-苄基氨基嘌呤、浓度为0.2mg/L的吲哚-3-丁酸的MS培养基，pH为6.0。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S4中，所述生根诱导培养基为含有浓度为0.45～0.5mg/L的吲哚-3-丁酸的MS培养基，pH为6.0。

8.一种培育大叶种巴戟天的方法，其特征在于，利用权利要求1～7所述方法制备得到大叶种巴戟天组培苗，然后对所述大叶种巴戟天组培苗进行炼苗和移栽培养，即得大叶种巴戟天。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述炼苗具体为：将根系生长良好的组培苗移入组培瓶中，保持温度20～25℃，相对湿度55％～65％，组培瓶密封置于自然光照条件下，放置2～3d后打开瓶口，自然光下炼苗4～5d，避免阳光直射。

10.根据权利要求8所述方法，其特征在于，所述移栽具体为：将炼苗结束的大叶种巴戟天组培苗去除培养基后，利用多菌灵溶液灭菌，清洗后移栽至草炭土和珍珠岩体积比1:1～1:1.5混匀的栽培基质中，正常浇水培养。