[发明专利]一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法在审
| 申请号： | 202210702442.5 | 申请日： | 2022-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN114875013A | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 段绪果;栾舒越;黄婷婷 | 申请（专利权）人： | 南京林业大学 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12N15/56;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 曹坤 |
| 地址： | 210037 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 使用 重组 枯草 芽孢 杆菌 分泌 天然 半乳糖 方法 | ||
1.一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，所述β-半乳糖苷酶lacZBa的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；其基因序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，
所述重组枯草芽孢杆菌的构建方法是：将SEQ ID NO.2所示的编码β-半乳糖苷酶lacZBa的基因与表达载体连接，转入至重组枯草芽孢杆菌中。
3.根据权利要求2所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，
所述表达载体为pCut。
4.根据权利要求2所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，
所述重组枯草芽孢杆菌包括Bacillus subtilis WB600或Bacillus subtilis 168，Bacillus subtilis WB400，Bacillus subtilis WB800。
5.根据权利要求1或2所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，
以重组枯草芽孢杆菌为宿主，以pCut为表达载体，表达氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的B.aryabhattai Gel-09来源的天然胞内β-半乳糖苷酶。
6.根据权利要求5所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，具体操作方法如下：将所述重组芽孢杆菌接种至发酵培养基中，于37℃，200rpm中培养60-96h。
7.根据权利要求6所述的一种使用重组枯草芽孢杆菌分泌天然胞内β-半乳糖苷酶的方法，其特征在于，
所述发酵培养基为TB培养基。
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