[发明专利]基于壳聚糖的多功能双亲性自组装纳米载体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种基于壳聚糖的多功能自组装双亲性纳米载体及其制备方法。该纳米载体以壳聚糖为主体，壳聚糖的氨基分别接有维生素E琥珀酸酯、聚乙二醇单甲醚和组氨酸；且所述基于壳聚糖的多功能自组装双亲性纳米载体能够用于药物/基因载体的制备。本发明制备得到的VCPH分散性好、稳定性高，具有良好的生物安全性；其制备的载药纳米粒稳定性强，包封率、载药量高。实际验证了，VCPH能够有效作为载药载体进行应用。

技术领域

本发明涉及一种壳聚糖改性的纳米材料，具体涉及一种基于壳聚糖的多功能自组装双亲性纳米载体及其制备方法，属于海洋生物材料制备技术领域。

背景技术

壳聚糖是由D-氨基葡萄糖和N-乙酰氨基葡萄糖单元组成，当壳聚糖的脱乙酰度达到50%左右时，溶于酸性水溶液；壳聚糖在酸性环境中溶解时，氨基变成阳离子，使壳聚糖成为唯一的阳离子海洋多糖。壳聚糖无毒无副作用，具有良好的保湿和吸附性能，然而因其不溶于水和大多数有机溶剂的缺点而限制了在各个领域的应用。通过对壳聚糖活性官能团进行化学修饰得到壳聚糖衍生物以发挥壳聚糖的更大作用。化学改性不仅可以保留壳聚糖的独特性质，还能改善壳聚糖的物理化学性质，扩大壳聚糖衍生物的应用范围。

利用壳聚糖作为药物/基因载体是当前的研究热点，也具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于壳聚糖的多功能双亲性自组装纳米载体，另一目的是提供该纳米载体的制备方法，并研究该纳米载体在药物/基因协同治疗肿瘤方面的应用。

为达到上述目的，本发明采取的具体技术方案为：

一种基于壳聚糖的多功能双亲性自组装纳米载体（VCPH），该纳米载体以壳聚糖为主体，壳聚糖的氨基分别接有维生素E琥珀酸酯（VES）、聚乙二醇单甲醚（mPEG）和组氨酸(His)。

进一步的，上述VCPH呈球形或椭球形，平均粒径为147.6±40.4 nm，PDI=0.38±0.029；VES的取代度为4.13 %，mPEG取代度为22.6%，His的取代度为17.39 %。

进一步的，上述VCPH表面Zeta电位为+32.8±7.3 mV。

所述VCPH的形态呈球形或椭球形，粒径大小较均一，分散性良好，纳米粒之间存在较强的静电作用，有利于纳米胶束保持稳定，且具有良好的生物安全性。

上述纳米载体的制备方法，包括以下步骤：

（1）将壳聚糖溶于稀酸溶液；

（2）制备 VES 溶液，并加入活化剂；

（3）将（1）得到的壳聚糖液滴加至（2）VES 溶液中，反应；

（4）将（3）反应完的混合液进行醇沉、透析和冻干，即得到海绵状维生素E琥珀酸酯-壳聚糖（VC）；

（5）将（4）得到的VC溶于酸液，制备mPEG溶液并进行活化，再将VC溶液滴加至mPEG溶液中进行反应；

（6）待（5）反应结束后，透析、冻干，得到产物维生素E琥珀酸酯-壳聚糖-聚乙二醇单甲醚（VCP）；

（7）将所述VCP溶于酸液，制备His溶液并进行活化，再将VCP溶液滴加至His溶液中进行反应；

（8）待（7）反应结束后，透析、冻干，得到终产物维生素E琥珀酸酯-壳聚糖-聚乙二醇单甲醚-组氨酸（VCPH）。

所述VCPH在共负载疏水药物和荷负电子基因载体制备中的应用。

进一步的，将疏水性药物分散于二甲亚砜中，将所述VCPH溶解于水中，二者混合均匀，透析处理，除去未包载的疏水性药物，冷冻干燥即得。

进一步的，将荷负电子基因溶解于水中，将包封疏水药物的纳米粒溶液滴加至基因水溶液中，二者混合均匀，静置制备可得。