[发明专利]一种蛋白组合物、其制备方法及其应用在审
申请号: | 202210777473.7 | 申请日: | 2022-06-30 |
公开(公告)号: | CN115043913A | 公开(公告)日: | 2022-09-13 |
发明(设计)人: | 胡玉立;徐松;石瑛;顾素云;刘国兴;薛霜;舒银辉;刘项羽;徐丹丹;石宝兰;谢红玲;漆世华 | 申请(专利权)人: | 国药集团动物保健股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/08 | 分类号: | C07K14/08;C12N15/40;C12N15/70;A61K39/12;A61P31/14 |
代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 付海萍 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 组合 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种蛋白组合物,其特征在于,所述蛋白组合物包括:
如SEQ ID NO:1所示的GP5蛋白;以及,
如SEQ ID NO:2所示的GP234蛋白。
2.如权利要求1所述的蛋白组合物,其特征在于,所述GP5蛋白的编码基因如SSEQ IDNO:3所示;和/或,
所述GP234蛋白的编码基因如SEQ ID NO:4所示。
3.如权利要求1所述的蛋白组合物,其特征在于,所述GP5蛋白与所述GP234蛋白的质量比为1:(1~3)。
4.一种制备如权利要求1~3任一项所述的蛋白组合物的方法,其特征在于,所述制备蛋白组合物的方法包括以下步骤:
获取如SEQ ID NO:1所示的GP5蛋白;
获取如SEQ ID NO.2所示的GP234蛋白;
将所述GP5蛋白与所述GP234蛋白进行复配,得到所述蛋白组合物。
5.如权利要求4所述的制备蛋白组合物的方法,其特征在于,所述获取如SEQ ID NO:1所示的GP5蛋白的步骤包括:
采用GP5扩增引物对以GP5蛋白的编码基因为模板进行克隆,得到含有酶切位点的GP5基因扩增片段,其中,所述GP5蛋白的编码基因如SEQ ID NO:3所示;
将所述GP5基因扩增片段与GP5载体质粒进行连接,得到GP5连接产物,将所述GP5连接产物导入GP5感受态细胞,得到GP5重组菌株;
将GP5重组菌株进行诱导表达后,得到所述GP5诱导表达菌株;
从所述GP5诱导表达菌株中提取表达蛋白,即得。
6.如权利要求4所述的制备蛋白组合物的方法,其特征在于,所述GP5 扩增引物对的序列如SEQ ID NO:5~6所示;和/或,
所述GP5感受态细胞来源于大肠杆菌。
7.如权利要求4所述的制备蛋白组合物的方法,其特征在于,所述获取如SEQ ID NO:2所示的GP234蛋白的步骤包括:
采用GP234扩增引物对以所述GP234蛋白的编码基因为模板进行克隆,得到含有酶切位点的GP234基因扩增片段,其中,所述GP234蛋白的编码基因如SEQ ID NO:4所示;
将所述GP234基因扩增片段与GP234载体质粒进行连接,得到GP234连接产物,将所述GP234连接产物导入GP234感受态细胞,得到GP234重组菌株;
将GP234重组菌株进行诱导表达后,得到所述GP234诱导表达菌株;
从所述GP234诱导表达菌株中提取表达蛋白,即得。
8.如权利要求4所述的制备蛋白组合物的方法,其特征在于,所述GP234扩增引物对的序列如SEQ ID NO:7~8所示;和/或,
所述GP234感受态细胞来源于大肠杆菌。
9.一种如权利要求1~3任一项所述的蛋白组合物或如权利要求4所述的制备蛋白组合物的方法在制备用于引发生物体对于猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫性应答的制剂中的应用。
10.一种疫苗,其特征在于,所述疫苗包括复配制剂及如权利要求1~3任一项所述的蛋白组合物,其中,在所述疫苗中,所述GP5蛋白的质量为25~300μg/ml,所述GP234蛋白的质量为25~100μg/ml,所述复配制剂的体积百分比为20~50%。
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