[发明专利]一种ICR小鼠皮肤损伤的模型建立方法及应用

说明书

本发明提出了一种ICR小鼠皮肤损伤的模型建立方法及应用；以ICR小鼠为实验动物，在近尾部区域后背注射毛霉毒素蛋白，形成局部的皮丘，来形成皮肤损伤的模型；并可以将模型应用在毛霉感染的研究中，能快速方便地开展毛霉病中与毛霉毒素蛋白相关研究，为毛霉病感染和毛霉毒素蛋白相关的基础研究和临床应用提供了新的方式。

技术领域

本发明涉及一种ICR小鼠皮肤损伤的模型建立方法及应用，属于微生物学和实验动物学技术领域。

背景技术

蓖麻毒素（Ricin toxin，RT）是一种广泛存在的植物毒素，属于II型核糖体失活蛋白（RIP），由A、B两条链构成，A链（RTA）具有使核糖体失活的能力，是毒性链；B链（RTB）为结合链，是一种半乳糖凝集素（Galectin）结合蛋白，可结合靶细胞并诱导细胞损伤。蓖麻毒素样蛋白基因存在于多种病原微生物中，在根孢囊霉（Rhizophagus）、德氏根霉（Rhizopusdelemar）、链球菌属（Streptomyces）、芽孢杆菌属（Paenibacillus）等中发现的RLT蛋白存在同源性，且均具有生物学毒力。

申请人多年来对毛霉菌致病毒力的基因组学开展了较为深入的研究，同时发现MI上清液可导致HUVECs损伤，提示MI可能分泌相关毒力因子损伤血管内皮。为明确MI外泌因子成分，申请人构建一种由毛霉毒素蛋白诱导ICR小鼠皮肤损伤的模型，以开展毛霉病感染机制中与毛霉毒素蛋白相关的基础研究和临床应用。

发明内容

针对上述存在的技术问题，本发明的目的是：提出了一种ICR小鼠皮肤损伤的模型建立方法及应用。

本发明的技术解决方案是这样实现的：一种ICR小鼠皮肤损伤的模型建立方法，包含以下步骤：

①以6-8周龄的雄性ICR小鼠为实验动物，在近尾部区域后背备皮后，在皮内注射25μg、1ml的毛霉毒素蛋白，形成局部的皮丘；

②将经过步骤①处理后的小鼠饲养7天。

优选的，所述的毛霉毒素蛋白是由毛霉菌B50a分离纯化形成。

优选的，所述的毛霉毒素蛋白的氨基酸序列如下：

MSLYFIRSQYNGRVLDVNDGSLEDGAEIIVWSQKGSDDCLNQLWRIEDGYIVNAKSAKALDISGGEMEPESAIIQYRQKSIEEAANQRWGIDSEGYIYSEARPDLVLDIQGREDEDGTPIILYNKREGEVASNQRWTLEEFQG。

优选的，所述的毛霉菌包含毛霉、少根根霉。

可以将上述构建的小鼠皮肤损伤模型应用在毛霉感染的研究中。

优选的，所述的毛霉感染包含由毛霉、少根根霉所引发的感染。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：

本发明以ICR小鼠为实验动物，在近尾部区域后背注射毛霉毒素蛋白，形成局部的皮丘，来形成皮肤损伤的模型；并可以将模型应用在毛霉感染的研究中，能快速方便地开展毛霉病中与毛霉毒素蛋白相关研究，为毛霉病感染和毛霉毒素蛋白相关的基础研究和临床应用提供了新的方式。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对本发明实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据本发明实施例的内容和这些附图获得其他的附图。

附图1为本发明所述的毛霉毒素蛋白诱导HUVECs的损伤情况图；

附图2为三组ICR小鼠的大体改变情况图；

附图3为毛霉毒素蛋白诱导ICR小鼠皮肤损伤的模型；

附图4为PBS皮下注射诱导ICR小鼠阴性对照组；