[发明专利]C2H2型锌指蛋白基因HSTL在调控水稻耐盐性中的应用在审

专利信息
申请号: 202210813808.6 申请日: 2022-07-11
公开(公告)号: CN115838734A 公开(公告)日: 2023-03-24
发明(设计)人: 丁艳菲;周媚;邵佳慧;朱诚;王飞娟;贺希格都楞;江琼 申请(专利权)人: 中国计量大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 杭州恒翌专利代理事务所(特殊普通合伙) 33298 代理人: 王从友
地址: 310018 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: c2h2 型锌指 蛋白 基因 hstl 调控 水稻 耐盐性 中的 应用
【权利要求书】:

1.C2H2型锌指蛋白基因HSTL和/或编码转录因子HSTL在调控水稻耐盐性和培育高耐盐性水稻品种中的应用;所述C2H2型锌指蛋白基因HSTL的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;其编码转录因子HSTL的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,C2H2型锌指蛋白基因HSTL及其编码转录因子HSTL通过负调控作用影响水稻的耐盐性。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,C2H2型锌指蛋白基因HSTL及其编码转录因子HSTL通过调控抗氧化酶活性影响水稻的耐盐性;优选,抗氧化酶为POD、SOD和CAT。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述高耐盐性水稻品种为通过CRISPR/Cas9技术,在HSTL基因内选取靶位点将该基因敲除所获得的水稻突变体;作为优选,所述的水稻突变体为hstl单突变体或hstl/hst双突变体;最优选hstl单突变体为hstl 3-1hstl 12-1,hstl/hst双突变体为hstl/hst 15-2hstl/hst 3-2

5.一种基因敲除载体,其特征在于,为C2H2型锌指蛋白基因HSTL的CRISPR/Cas9基因敲除载体,包含SEQ ID NO:3-6所示的核苷酸序列。

6.一种重组菌和/或转基因细胞系,其特征在于,包含权利要求5所述的基因敲除载体。

7.权利要求5或6所述的基因敲除载体、重组菌和/或转基因细胞系在调控水稻耐盐性和培育高耐盐性水稻品种中的应用。

8.权利要求1-4任意一项权利要求所述高耐盐性水稻品种的培育方法,其特征在于,包括以下步骤:通过CRISPR/Cas9技术,设计特异性靶向HSTL基因编码序列的sgRNA,构建得到基因敲除载体,将其转化入水稻,对获得的植株进行鉴定以获得水稻突变体。

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述sgRNA表达框的引物序列如SEQ IDNO:7-10所示。

10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述水稻突变体鉴定的引物序列如SEQID NO:11和SEQ ID NO:12所示。

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