[发明专利]基于LAYN阳性T细胞的用于杀伤肿瘤的TCR-T细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于LAYN阳性T细胞的用于杀伤肿瘤的TCR-T细胞，其特征在于，所述TCR-T细胞为携带有识别肿瘤抗原TCR的T细胞，所述TCR-T细胞中的TCR来源于：

1)在肿瘤中表达LAYN的CD4 T细胞；和/或

2)在肿瘤中表达LAYN的CD8 T细胞。

2.根据权利要求1所述的TCR-T细胞在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤是肺癌、黑色素瘤、肠癌、肝癌、胃癌，乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肾癌、膀胱癌、食管癌中的任意一种或多种。

4.根据权利要求1所述的TCR-T细胞的制备方法，其特征在于包括：将识别肿瘤抗原的TCR的核苷酸序列的一个或多个导入到T细胞中进行表达，构建所述TCR-T细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述识别肿瘤抗原的TCR的鉴定步骤如下：通过流式分选、磁珠分离或肿瘤组织原位测序方法，由肿瘤组织获得表达了识别肿瘤抗原CD4 T细胞的标志物LAYN的T细胞及其携带的TCR序列，以及表达了识别肿瘤抗原CD8T细胞的标志物LAYN的T细胞及其携带的TCR序列。

6.一种用于鉴定识别肿瘤抗原的T细胞和TCR的方法，其特征在于包括以下步骤：通过克隆肿瘤组织中的高频TCR，建立表达TCR的TCR-T细胞，利用表达肿瘤抗原串联基因的抗原呈递细胞进行体外肿瘤抗原刺激，能够被刺激起来的TCR-T细胞所携带的TCR即为识别肿瘤抗原的TCR，携带该TCR的T细胞即为识别肿瘤抗原的T细胞；

其中，所述TCR-T细胞中的TCR来源于：

1)在肿瘤中表达LAYN的CD4 T细胞；和/或

2)在肿瘤中表达LAYN的CD8 T细胞。