[发明专利]一种甘蔗组培脱毒方法

权利要求书

1.一种甘蔗组培脱毒方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)：用于脱毒的甘蔗种原材料种植于水肥条件较好的地块，加强水肥管理，甘蔗种原材料生长充分，从田间选择生长健壮的甘蔗植株，选取中段成熟茎节作为脱毒的材料；

(2)：选取步骤(1)中的茎节作为脱毒的材料，茎节的芽选择成熟饱满的芽，茎节切成三至五个芽一段，放于恒温水浴锅中；

(3)：步骤(2)温水处理过的甘蔗种茎，切成单芽后浸泡于抗病菌药液泡种10分钟，38-42℃恒温催芽1周；

(4)：步骤(3)中恒温催芽得到10cm的芽，在无菌的超净工作台中切取1-3mm茎尖，接种于MS液体培养基中，培养出愈伤组织，分化出试管苗；

(5)：步骤(4)中的试管苗经过分化长出10-30个芽后，转入生根培养基中培养15天，可再次切取茎尖分生组织，接种于液体培养基中，培养出愈伤组织，分化出新的试管苗；

(6)：步骤(5)根据品种和PCR检测的结果，带毒的试管苗重复进行茎尖脱毒培养；步骤(4)和(5)中获得的试管苗取叶片进行病毒的检测；通过甘蔗花叶病和宿根矮化病的检测，分离出不带病毒的健康组培种苗单株，并通过组培快繁的方法大量繁育出甘蔗的健康种苗，推广应用于甘蔗种植区。

2.根据权利要求1所述的一种甘蔗组培脱毒方法，其特征在于：所述步骤(2)中，放于恒温水浴锅中的温度为52-58℃，温水浸泡时间为30-120min。

3.根据权利要求1所述的一种甘蔗组培脱毒方法，其特征在于：所述骤(3)中，抗病菌药液由2.5％咯菌腈悬浮剂1200倍液、8％宁南霉素水剂1200倍液、5％氨基寡糖素水剂2000倍液、30％盐酸吗啉胍1500倍液、螯合锌肥1000倍液组成。

4.根据权利要求1所述的一种甘蔗组培脱毒方法，其特征在于：所述骤(5)中，切取茎尖分生组织的长度为1-3mm。

5.根据权利要求1所述的一种甘蔗组培脱毒方法，其特征在于：所述骤(4)和(5)中，液体培养基中含有1-3mg/L 2,4-D的MS。