[发明专利]一种用于鉴定乙酸乙酯产生菌株的简并引物及其应用

权利要求书

1.鉴定或辅助鉴定乙酸乙酯产生菌株的简并引物对，其特征在于，所述简并引物对包括针对基因ATF1的简并引物对A和/或针对基因EAT1的简并引物对B；所述简并引物对A由核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸片段组成，所述简并引物对B由核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸片段组成。

2.鉴定或辅助鉴定乙酸乙酯产生菌株的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述简并引物对。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有PCR反应缓冲液。

4.权利要求1所述的简并引物对或权利要求2或3所述的试剂盒在筛选或检测乙酸乙酯产生菌株的方法，其特征在于，所述方法具体步骤如下：

(1)提取待测样本DNA；

(2)以步骤(1)待测样本DNA为模板，利用所述简并引物对进行PCR扩增；

(3)根据PCR扩增产物的大小确定待测样本中是否含有乙酸乙酯产生菌株。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR扩增的退火条件为48～52℃退火55～65s。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，简并引物对A的PCR扩增条件为95℃3min；95℃30s；52℃1min；72℃1min；30个循环，简并引物对B的PCR扩增条件为95℃3min；95℃30s；50℃1min；72℃1min；30个循环；简并引物对A和B的多重PCR扩增条件为95℃3min；95℃30s；48℃1min；72℃1min；30个循环。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，利用简并引物对A时，PCR扩增产物大小为420～440bp；利用简并引物对B时，PCR扩增产物大小为220～270bp；利用简并引物A和B时，PCR扩增产物大小为300～360bp和220～270bp。

8.权利要求1所述的简并引物对或权利要求2或3所述的试剂盒在筛选或检测乙酸乙酯产生菌株中的应用。

9.权利要求1所述的简并引物对在制备筛选或检测乙酸乙酯产生菌株的产品中的应用。

10.权利要求1所述的简并引物对在宏基因组检测和分析中的应用。