[发明专利]一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记及其应用，其中PCR引物序列为K‑7415F和K‑7415R。检测步骤如下：采用CTAB法提取小麦‑长穗偃麦草短片段易位系叶片的全基因组DNA；利用分子标记K‑7415对提取DNA进行PCR扩增；PCR产物在1％琼脂糖凝胶中上样电泳，电泳结束后用AlphaInnotechV.1.2型凝胶成像系统照相并观察结果。本发明中的分子标记K‑7415与抗茎基腐基因Fhb7紧密连锁，利用该分子标记可提高分子标记辅助选择的效率，并且可直接应用于小麦抗茎基腐病生产实践，为通过分子标记辅助选择的方法选育携带Fhb7的抗茎基腐病小麦改良系提供技术支撑。

技术领域

本发明属于小麦分子育种的技术领域，具体涉及一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7 的分子标记及其应用。

背景技术

小麦是全球重要粮食作物之一。提高小麦对各种病害的抗性，这样可以挽回每年因病害导致的15-20％的产量损失。茎基腐病是小麦真菌病害的一种，近年来在我国黄淮麦区呈逐年加重趋势，已成为严重威胁小麦生产的重要病害，2022年被列为我国10个产业技术问题之一。

研究表明，培育和种植抗病品种是解决小麦茎基腐病问题最经济有效的措施。然而，目前生产上可以利用的有效抗源却很少，来自长穗偃麦草的Fhb7是目前唯一的一个已知的主效抗病基因，利用生物技术的方法，可以将该基因转移到感茎基腐病的推广小麦品种中。但是传统方法费时费力、表型鉴定困难、育种效率低，借助分子标记辅助选择育种可以有效解决这一问题。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明提供了一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记及其应用。

本发明的目的是提供特异性识别扩增小麦抗茎基腐病基因Fhb7的连锁分子标记，以及小麦抗茎基腐病育种方面进行应用。

本发明的技术方案如下：

本发明提供一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记，PCR引物序列K-7415F为SEQ ID NO.1所示序列，引物序列K-7415R为SEQ ID NO.2所示序列；

SEQ ID NO.1：TTATCTGTCACGAGCATAGGC；

SEQ ID NO.2：AGTATTCTTCTTGAGGCGAGTC。

本发明还提供一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记的应用，在鉴定小麦- 长穗偃麦草短片段易位系抗茎基腐病基因型中的应用。

本发明提供鉴定小麦-长穗偃麦草短片段易位系抗茎基腐病基因型为利用引物K-7415F和K-7415R进行扩增，扩增出165bp的条带，代表检测样品含有Fhb7基因；无法扩增出条带，代表检测样品不含有Fhb7基因。

优选的，PCR扩增和条带检测包括以下步骤：

(1)采用CTAB法提取样品基因组DNA；

(2)以提取DNA为模板进行PCR扩增；

(3)1％琼脂糖凝胶检测PCR产物。

更优选的，DNA模板1μL，2×Taq Master Mix 7.5μL，浓度为10μmol/L的引物 K-7415F和K-7415R各为1μL，加水至15μL。

更优选的，所述PCR其反应反应程序是95℃5min；95℃30s，60℃30s，72℃30s， 35循环；72℃10min。

本发明还提供了在小麦抗茎基腐病分子育种中的应用。