[发明专利]一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法

说明书

本发明一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，涉及一种硫化氢检测方法。该方法首先制备荧烷类衍生物探针为含叠氮取代基的荧烷类衍生物，结构通式为：其中，R₁、R₂为正丁基或苯基，R₃为苯氧基、1‑萘氧基或有取代基的苯氧基，所述的取代基为硝基、三氟甲基。本发明的荧烷类衍生物探针用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测，操作简单，方便快捷，该类荧光探针制备工艺操作条件简单、产品后处理方法简易、转化率较高，易实现工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种硫化氢检测方法，特别是涉及一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法。

背景技术

硫化氢（H₂S）是一种具有刺激性的无色气体，被生物体吸收后会影响细胞的氧化过程。低浓度的硫化氢接触会对呼吸道产生局部刺激作用，高浓度接触时表现为中枢神经系统症状和窒息症状。硫化氢虽然为一种剧毒气体，但是内源性硫化氢被研究者认为是第三种气体信号分子。内源性硫化氢可参与多种生理活动，例如血管舒张、细胞保护、神经传导、凋亡、糖代谢、胰岛素分泌等。可见，对低浓度硫化氢的准确测定在疾病诊断方面非常有意义。

目前检测硫化氢的分析方法主要包括汞量法、检测管法、亚甲基蓝比色法、荧光探针法等方法，众多方法中荧光探针法选择性较好、操作方便、检测灵敏度高。而荧烷类化合物由于其结构中的氧桥结构，使整个分子保持了较强的刚性平面结构，有利于产生强烈的荧光。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，本发明基于荧烷母核，设计并合成了荧烷类衍生物的荧光探针，其结构中的叠氮取代基用于硫化氢的检测，与硫化氢接触后被还原为氨基，探针的化学结构发生变化导致荧光光谱的变化，实现硫化氢的定量检测，响应速度快，专抗干扰性强。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述方法包括以下步骤：

(1)制备的荧烷类衍生物探针其化学结构通式如下：

其中，R₁、R₂为正丁基或苯基，R₃为苯氧基、1-萘氧基或有取代基的苯氧基，所述的取代基为硝基、三氟甲基；

(2)制备的2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针，溶解于PBS:乙醇混合液(9：1)中配制探针储备液，浓度为10 μM；使用PBS:乙醇混合液(9：1)配制系列离子或分子浓度为10 μM的溶液，将两者以相同提体积混合，30 ^oC下静置30分钟，测量并记录其在563 nm下的荧光强度，发现仅加入硫化钠(硫化氢释放剂)的溶液有较强的荧光，用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测即可。

所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述R₃为下列之一：苯氧基、1-萘氧基、3-三氟甲基苯基、3-硝基苯基。

所述的一种用荧烷类衍生物探针检测硫化氢方法，所述的荧光探针在563 nm的荧光强度与待测硫化氢浓度之间的标准曲线为y = 229.36x + 4.27 。

本发明的优点与效果是：

本发明的荧烷类衍生物探针可使用荧光分光光度计实现微量硫化氢的定量检测，操作简单，方便快捷，提高检测效率，提供一类荧烷类衍生物。该类荧光探针制备工艺操作方便、产品后处理方法简易、转化率较高，易实现工业化生产；灵敏度高，荧光发射光谱特性良好，探针与待测物反应所需时间短，30分钟内性质稳定，通过标准曲线测定硫化氢含量。

附图说明

图1为本发明 2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针与不同离子或分子反应后荧光强度图；

图2为本发明 2-叠氮-3-(3-硝基苯基)-6-二丁基氨基荧烷作为荧光探针的荧光强度与硫化氢浓度的线性关系图；