[发明专利]一种用于检测有机磷农药的双信号传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于检测有机磷农药的双信号传感器，其特征在于，由巯基化的单链cDNA和FAM标记的aptamer修饰到Ag/Au NPs表面，获得纳米探针；纳米探针与AChE、CHO、ACh混合溶液构成双信号传感器。

2.根据权利要求1所述的用于检测有机磷农药的双信号传感器，其特征在于，所述cDNA序列为：5’-SH-GGT GGG TG-3’，所述aptamer序列为：5’-FAM-CCT CCC TCC TTT TCC ACCCAC C-3’。

3.一种权利要求1所述的用于检测有机磷农药的双信号传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)Ag/Au NPs的制备：以银纳米粒子作为晶种溶液，向其中加入去离子水并加热至沸腾，在剧烈搅拌下加入氯金酸和盐酸羟胺，将溶液加热回流，待自然冷却至室温后，得到Ag/Au NPs溶液存储备用；

(2)功能纳米探针的制备：将BSPP加入到Ag/Au NPs溶液中，搅拌后离心洗涤后重新分散，将cDNA加入上述溶液中，振荡后离心洗涤后分散得到cDNA功能化Ag/Au NPs；继续加入aptamer至上述cDNA功能化Ag/Au NPs溶液中，，孵育后离心洗涤后分散制得功能纳米探针；

(3)双信号传感器的构建：将AChE、CHO、ACh混合温育后加入步骤(2)得到的纳米探针溶液构建双信号传感器。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中将BSPP加入到Ag/Au NPs溶液中，在室温搅拌下温育过夜，离心洗涤后重新分散于PBS中。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中cDNA和aptamer为等摩尔加入。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中将cDNA加入溶液后，室温下振荡20-24h，离心洗涤后分散于PBS中得到cDNA功能化Ag/Au NPs；继续加入aptamer至cDNA功能化Ag/Au NPs溶液中，30-37℃下温育6-10h，离心洗涤后分散于PBS中制得功能纳米探针。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中纳米探针加入体系中的浓度为0.1-0.2nM。

8.一种权利要求1所述的双信号传感器优选在有机磷农药同时检测并成像中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用的过程为：传感器中加入不同浓度的有机磷农药，利用LSPR散射光谱仪和荧光光谱仪进行检测，分别得到LSPR散射峰位移和有机磷农药浓度的线性关系，荧光强度和有机磷农药浓度的线性关系；传感器中加入不同浓度的有机磷农药，滴加到氨基修饰的载玻片上，利用倒置显微镜进行LSPR和荧光成像分析。