[发明专利]吴茱萸碱衍生物在预防或治疗绝经后骨质疏松症的应用

说明书

本发明涉及医药领域，具体是吴茱萸碱衍生物在预防或治疗绝经后骨质疏松症的应用，所述的吴茱萸碱及其衍生物的结构如通式I所示，化合物E1为10‑羟基‑吴茱萸碱，化合物E2为3‑胺基‑10‑羟基‑吴茱萸碱。本发明为吴茱萸碱衍生物E1和E2提供了一种新的功能应用，也为绝经后骨质疏松症的预防和治疗提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种吴茱萸碱衍生物在预防或治疗绝经后骨质疏松症的应用。

背景技术

骨质疏松症是一种与年龄相关的公共卫生问题，其特征是一种全身性骨骼疾病，骨密度降低，骨折风险增加。绝经后骨质疏松症(PMOP)是一种常见的退行性骨病，威胁着数百万绝经后妇女的健康。随着人口老龄化，原发性骨质疏松症的发病率显着增加。骨质疏松症导致骨折发病率提高，对公众健康构成严重威胁。因此，开发临床抗骨质疏松药物至关重要。

天然产物(NPs)是治疗人类疾病药物丰富的来源。吴茱萸碱(EVO)是传统中药吴茱萸的主要成分，具有显著的抗肿瘤和抗炎活性。尽管EVO最近被证明具有抗骨质疏松活性，但低水溶性导致疗效不佳。研究人员此前证实，在EVO的结构中3位或10位引入供电或吸电基团可以增强其水溶性并提高其药理功效。因此，为了提高EVO的抗骨质疏松活性，首先合成了10-羟基EVO，通过在a环位置引入羟基获得EVO衍生物E1。此外，为了进一步提高其抗骨质疏松活性，在E1的E环中引入胺基，获得3-氨基-10-羟基-EVO E2，以期提高其抗骨质疏松药理活性。

本研究目的是阐明化合物E1和E2在体外破骨细胞生成中的保护作用。同时通过使用卵巢切除术(OVX)诱导的骨破坏小鼠模型强调了E2在骨疾病中的治疗潜力。

目前尚未有文献报道对吴茱萸碱衍生物进行修饰提高治疗绝经后骨质疏松症的疗效，本研究首次揭示EVO衍生物对骨代谢的影响。

发明内容

本发明的目的在于提供两种吴茱萸碱衍生物，特别是其在预防或治疗绝经后骨质疏松症的应用。

本发明在实验中，通过HE切片和Micro-CT结果证明吴茱萸碱衍生物可明显减轻小鼠去卵巢后的骨质丢失。

本发明提供一种吴茱萸碱衍生物在预防或治疗绝经后骨质疏松症的应用，所述的吴茱萸碱及其衍生物E1和E2的结构如通式I所示：

附图说明

图1.A为EVO、衍生物E1和E2的化学结构。在体外，我们研究了EVO衍生物对破骨细胞前体细胞的细胞毒性，B图显示在有或没有指定浓度的EVO衍生物处理96小时后，通过CCK-8测定评估的BMM细胞活力情况。数据表示为平均值±标准差(n＝3)。

图2.A图指用RANKL刺激下有或没有指定浓度的EVO衍生物的BMM分化破骨细胞的代表性TRAP染色图像。B和C图为对具有3个或更多核的TRAP阳性多核破骨细胞的数量和大小进行量化。D为通过实时荧光定量PCR对E2处理后破骨细胞标记基因(TRAP、CTSK、DC-STAMP和NFATc1)的相对表达水平进行检测。值表示为平均值±标准差(n＝3)；*p0.05，**p0.01，***p0.001。

图3.A为不存在或存在不同浓度的E2，且在RANKL刺激5天后的肌动蛋白环染色BMM衍生破骨细胞的代表性荧光图像。肌动蛋白环和细胞核分别用TRITC鬼笔环肽(红色)和DAPI(蓝色)染色。B和C是对A的量化，B表示平均细胞大小，C表示每个破骨细胞的平均细胞核数。D为不存在或存在不同浓度E2的情况下，成熟破骨细胞骨吸收的代表性图像。将用RANKL刺激3天的前破骨细胞接种到羟基磷灰石涂层的96孔板上，然后用或不用指定浓度的E2再处理3天。用次氯酸钠去除细胞，并在光学显微镜下对骨吸收进行成像。E为对D图骨吸收面积百分比进行量化。值表示为平均值±标准差(n＝3)；*p0.05，**p0.01，***p0.001。