[发明专利]一种基于GC-MS技术的鳞翅目成虫快速鉴定方法

说明书

本发明公开了一种基于GC‑MS技术的鳞翅目成虫快速鉴定方法。该鉴定方法包括以下步骤：1)将鳞翅目成虫一侧前足的足胫跗节剪下；2)将前足胫跗节置于热分离进样杆进样小瓶中；3)再将热分离进样杆插入GC‑MS进样口中，使前足胫跗节的挥发性成分直接气化，进入GC‑MS进行化学成分分析；4)通过分析样品中碳氢化合物的种类和含量比例，进行种类鉴定。本发明通过分析鳞翅目成虫体表碳氢化合种类和含量比例，对成虫种类进行鉴定，分析速度快，且操作简单，是一种鳞翅目成虫种类鉴定的可靠手段。

技术领域

本发明属于昆虫鉴定技术领域，具体涉及一种基于GC-MS技术的鳞翅目成虫快速鉴定方法。

背景技术

国内鳞翅目昆虫种类约8000种，绝大多数幼虫危害各类植物，其中许多种类是重大农林害虫。这些害虫的种群动态监测对其发生预测预报起着重要作用。高空测报灯、黑光灯、性诱诱捕器、食诱诱捕器等成虫诱捕装置被应用于鳞翅目害虫测报中。而在鳞翅目成虫种群监测过程中，首先要对收集到的成虫进行种类鉴定。

成虫身体、翅上形成各色斑纹的鳞片(鳞毛)是种类鉴定的重要特征。成虫鳞片极易脱落，通常诱集和捕捉到的鳞翅目成虫大多鳞片部分缺失，形态鉴定难度大，尤其对于成虫形态相近的种类。例如夜蛾科，作为鳞翅目第一大科，国内已知约1600种，成虫形态相近，鳞片形成各色的斑纹是成虫形态鉴定重要依据。而通过分子手段进行鉴定耗时较长，且操作复杂，成本高。

昆虫体表碳氢化合物具有防止水分散失，并作为信息化合物在化学通讯中起到信息载体的功能。体表碳氢化合物的种类和含量比例在种内具有一致性，可作为种间鉴定的依据。传统昆虫体表碳氢化合物的提取通常使用液体浸提法进行，即用有机溶剂将昆虫体表碳氢化合物进行提取，一般需要12-24小时。该方法提取到的体表碳氢化合物含量较低，所以提取液通常还需要经过浓缩，且部分材料即使浓缩后也难以达到理想的检测浓度，直接影响成分的定量和定性。近些年来，固体进样技术以其分析快速，操作简单，被应用于部分种类的的昆虫体表挥发性成分分析中。

昆虫前足胫跗节在头部和胸部的梳理过程中起到重要作用，梳理过程中可将体表碳氢化合物均匀的涂抹到体表，因此胫跗节上面的体表碳氢化合物种类相对于其他部位比较丰富。

发明内容

本发明的目的是针对在鳞翅目成虫监测过程中，虫体鳞片极易脱落，通常诱集和捕捉到的鳞翅目成虫大多鳞片部分缺失，种类形态鉴定难度大问题，提供一种基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)的鳞翅目成虫快速鉴定方法。

本发明通过GC-MS技术，分析了多种常见鳞翅目害虫的雌雄成虫体表碳氢化合物成分，通过比对不同种成虫的体表碳氢化合物组成，进行种类鉴定，通过该方法可有效和快速地将多种鳞翅目成虫区分开。

因此，本发明的第一个目的是提供一种基于GC-MS技术的鳞翅目成虫快速鉴定方法。

优选的，所述的鳞翅目成虫为羽化3～6天的雌或雄成虫。

优选的，步骤3)中，所述的GC-MS的检测条件为：进样口温度为290℃，色谱柱为DB-5毛细管柱，无分流进样；升温程序为起始温度50℃，以30℃/min的速率程序升温至260℃，以2℃/min的速率程序升温至300℃，再保持5min；以纯度99.999％的氦气作为载气；电离方式EI，电离能量为70eV，离子源发生器温度为230℃，质量扫描范围为30～330amu。

优选的，步骤4)中，所述的通过分析样品中碳氢化合物的种类和含量比例，进行种类鉴定，具体为：依据不同鳞翅目成虫的体表碳氢化合物各组分的峰面积，通过数据进行对数转换，转换的数据再进行主成分分析，主成分贡献率达到90％以上；利用主成分进行判别分析，进而对不同种鳞翅目成虫进行种类鉴定。

本发明的第二个目的是提供上述的鉴定方法在快速鉴定鳞翅目成虫中的应用。