[发明专利]一株娄彻氏链霉菌WA11-1-1及其应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株娄彻氏链霉菌WA11‑1‑1及其应用。本发明提供的娄彻氏链霉菌WA11‑1‑1分离自美洲大蠊，目前该菌株保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.61629，保藏日期为2021年5月19日。本发明提供的娄彻氏链霉菌WA11‑1‑1在发酵中可将7‑木糖‑10‑去乙酰基紫杉醇转化为10‑去乙酰紫杉醇，在木聚糖浓度0.8％，发酵时间4d，发酵温度28℃，装液量250mL的条件下，转化率可达到40.72±1.08％，相对优化前提高了1.85倍，可用于抗癌药物的制备，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株娄彻氏链霉菌WA11-1-1及其应用。

背景技术

紫杉醇(Taxol)是一种二萜类抗癌化合物，临床上广泛应用于晚期卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌等治疗。紫杉醇来源于濒危物种-红豆杉属植物的树皮，产量极其有限，导致紫杉醇价格高昂。

7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇(7-β-xylosyl-10-deacetylpaclitaxel，7-XDT)等7-木糖紫杉烷类化合物是紫杉醇的母核结构类似物，它主要存在于红豆杉的根、茎、叶中，含量至少是紫杉醇的5倍以上，但未得到充分利用。

10-去乙酰紫杉醇(10-deacetylpaclitaxel，10-DAT)目前虽无法用于紫杉醇的半合成，但可通过10-去乙酰巴卡亭III 10β-O-乙酰转移酶(10-deacetylbaccatin III-10-β-O-acetyltransferase，DBAT)直接转化为紫杉醇。

Hao等通过富集培养从温带地区的红豆杉周围土壤中分离到一株新的放线菌DICP16，对它进行了分类学上的鉴定，确定为Leifsonia shinshuensis sp.。菌株DICP16的7-β-xyl可以水解7-XDT的C-7木糖残基，从而得到10-DAT和10-DAB。Wang等从云南昆明地区筛选到4株菌可以产生7-β-xyl，可将7-XDT转化为10-DAT，经形态学、生理学和遗传学鉴定，其中一株菌是马特链霉菌(Streptomyces matensi)。刘宇等对52株供试微生物进行以木聚糖为唯一碳源的琼脂平板筛选得到一株天蓝色链霉菌(Streptomycesc coelicolor)，该菌也同样具有转化7-XDT为10-DAT的能力。Dou等从云南红豆杉根际土壤中分离到一株纤维化纤维微细菌(Cellulosimicrobium cellulans strain F16)，实现7-XDT到10-DAT的生物转化。Wang等发现9株放线菌产生了对7-XDT有转化活性的7-β-xyl，高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography，HPLC)验证转化产物为10-DAT，这些放线菌分别属于5个属，即纤维微菌属(Cellulosimicrobium)、纤维单胞菌属(Cellulomonas)、厄氏菌属(Oerskovia)、脱醌菌属(Demequina)和放线纤丝菌属(Actinotalea)。

发明内容

针对现有技术普遍具有的缺陷，本发明提供了一种娄彻氏链霉菌WA11-1-1及其应用。本发明首次将娄彻氏链霉菌WA11-1-1用于生产7-β-xyl酶，且在本发明条件下，10-DAT的转化率可达到40.72±1.08％，相对优化前提高了1.85倍。

为了达到上述目的，本发明采用的技术效果为：

一株娄彻氏链霉菌WA11-1-1，所述娄彻氏链霉菌WA11-1-1为Streptomycesrochei，保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.61629，保藏日期为2021年4月26日。

本发明还提供了一种所述娄彻氏链霉菌WA11-1-1在生产7-β-xyl酶中的应用。

优选地，所述7-β-xyl酶的反应温度为35℃，反应pH为6；贮存温度为20℃～30℃，pH为7。