[发明专利]一种适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分析方法有效
申请号: | 202211171513.X | 申请日: | 2022-09-26 |
公开(公告)号: | CN115267013B | 公开(公告)日: | 2022-12-13 |
发明(设计)人: | 王海梅;张志乾;王嘉鹏;吴奕瑞;傅伟;朱家平;江翱;邱益;王帆;崔华;谭洪群 | 申请(专利权)人: | 广州市乾相生物科技有限公司;山东乾肽生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/36 |
代理公司: | 北京佰亦知识产权代理事务所(普通合伙) 16097 | 代理人: | 陈柳叶 |
地址: | 510260 广东省广州市海珠区新港西路13*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 多种 棕榈 酰基肽 hplc 分析 方法 | ||
1.一种适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:
第一步:配制多个待测棕榈酰基肽样品的溶液,所述棕榈酰基肽样品是单一种棕榈酰基肽;
第二步:根据配制的待测棕榈酰基肽样品的种类,设定液相色谱条件;
第三步:配制分析用流动相;
第四步:采用分析程序对其中一个待测棕榈酰基肽样品进行测定;
第五步:采用流动相B清洗色谱柱1~5min;
第六步:重复第四步和第五步,对其他未测的待测棕榈酰基肽样品依次进行测定;
其中:
对于所述分析用流动相,流动相A为0.2%磷酸水溶液,用三乙胺调pH至3.5;流动相B为甲醇;
分析程序为等度洗脱,洗脱浓度:流动相A:15%,流动相B:85%;
所述色谱柱为填料为C18的色谱柱;
所述棕榈酰基肽为棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5、棕榈酰三肽-8、棕榈酰四肽-7、棕榈酰五肽-4。
2.根据权利要求1所述的适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:所述待测棕榈酰基肽样品依照如下比例进行配制,称取0.008~0.012g棕榈酰基肽,根据需要加入0~8.5mL甲醇,再加入0.2mL磷酸,所述棕榈酰基肽溶解后加入超纯水补充至10mL,溶解后即得浓度为0.0008~0.0012g/ml的所述待测棕榈酰基肽样品的溶液。
3.根据权利要求2所述的适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:所述待测棕榈酰基肽样品的浓度为0.001g/ml。
4.根据权利要求1或2所述的适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:波长范围为200~300nm。
5.根据权利要求1或2所述的适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:流速为1 mL/min。
6.根据权利要求1或2所述的适用于多种棕榈酰基肽的HPLC分离方法,其特征在于:色谱柱柱温为室温,进样量为8~15μL,进样器温度为环境温度,待测样品采集时间为10~30min。
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