[发明专利]一种白术内生真菌及其在白术悬浮细胞培养中的应用在审
申请号: | 202211175501.4 | 申请日: | 2022-09-26 |
公开(公告)号: | CN115820430A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 裘芳琼;朱波;秦路平;孙天驰;朱烨婷 | 申请(专利权)人: | 浙江中医药大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N5/04;C12P17/04;C12R1/785 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 邱启旺 |
地址: | 310053 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 白术 真菌 及其 悬浮 细胞培养 中的 应用 | ||
1.一种白术内生真菌,其特征在于,所述的内生真菌是从菊科苍术属植物白术活体中分离所得,分类命名为接合菌门毛霉菌目总状毛霉(Mucor racemosus)AM481-1,已于2022年9月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCCNo.40311。
2.根据权利要求1所述白术内生真菌在白术悬浮细胞培养中的应用,其特征在于,所述应用为:将制备的内生真菌AM481-1诱导子添加到白术悬浮细胞培养体系,促进白术悬浮细胞生长与次生代谢产物积累。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,内生真菌AM481-1诱导子是按照以下步骤制备:(1)将AM481-1菌株接种于PDA培养基活化并接种到120℃高压灭菌20min的PDB培养基中,于26℃、150r/min下摇床震荡培养;(2)收集、清洗烘干菌丝后处理成粉末,收集菌丝粉末,加入无菌水进行悬浮,用无菌水将诱导子溶液浓度调至2mg/mL,即得。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,内生真菌AM481-1是通过PDB培养基制备得到,PDB培养基的配方是:200g土豆,20g葡萄糖,1000mL蒸馏水,pH自然。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,在无菌条件下,将诱导子添加至白术悬浮细胞培养体系中,添加量为1mg/mL,培养15d。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,内生真菌AM481-1诱导子促进白术悬浮细胞生长表现为白术悬浮细胞鲜重的增长。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,白术悬浮细胞鲜重的增长率按照公式计算:增长率=(诱导子处理组悬浮细胞鲜重-对照组悬浮细胞鲜重)/对照组悬浮细胞鲜重×100%。
8.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,内生真菌AM481-1诱导子促进白术悬浮细胞次生代谢产物积累表现为白术悬浮细胞白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ与苍术酮含量的提升。
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