[发明专利]解淀粉芽孢杆菌及其菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌LYM152，其特征在于，该菌株分离自黑水虻肠道，已于2019年9月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为Bacillusamyloliquefaciens LYM152，保藏编号为CGMCC No.18497；所述菌株的16S rRNA基因序列如SEQ NO.1所示。

2.一种菌剂，其特征在于，该菌剂包括权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌LYM152。

3.一种制备权利要求2所述菌剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、菌株活化：挑取菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱28～37℃培养16～24h；

S2、液体种子制备：将步骤S1中活化好的解淀粉芽孢杆菌LYM152接种于装有液体种子培养基的容器中，纱布封口，28～37℃、160～220r/min条件下振荡培养16～24h，得到液体种子；

S3、液体发酵：将步骤S2中制备的液体种子按体积比1～10％接种量接种于发酵培养基，转速200～700r/min，溶氧控制20～40％，pH 6.0～7.5，温度28～37℃，10L发酵罐通气培养24～48h，得到解淀粉芽孢杆菌LYM152的液体菌剂。

4.根据权利要求3所述的菌剂的方法，其特征在于，所述固体斜面培养基为：葡萄糖1～3g/L，酵母浸粉3～7g/L，蛋白胨5～15g/L，NaCl 2～7g/L，琼脂15～20g/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。

5.根据权利要求3所述的菌剂的方法，其特征在于，所述液体种子培养基为：葡萄糖5～15g/L，牛肉膏1～5g/L，酵母浸粉3～7g/L，KH₂PO₂ 0.5～2.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1～1.0g/L，CaCl₂·2H₂O 0.1～0.5g/L，(NH4)₂SO₂ 1～5g/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。

6.根据权利要求3所述的菌剂的方法，其特征在于，所述发酵培养基为：葡萄糖15～25g/L，牛肉膏1～5g/L，酵母浸粉0.5～2.0g/L，KH₂PO₄ 0.5～2.0g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2～0.6g/L，CaCl₂·2H₂O 0.1～0.5g/L，柠檬酸铵1～5g/L，玉米浆5～15g/L，FeSO₄ 0.5～2.0mg/L，维生素B₁ 1～3mg/L，蒸馏水溶解定容至1L，pH 7.0～7.2，121℃高压蒸汽灭菌15～20min。

7.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂可浓缩制成液体菌剂或冷冻干燥制成固体菌粉，所述菌剂中解淀粉芽孢杆菌LYM152的活菌量不低于10⁸cfu/mL或10⁸cfu/g。

8.权利要求2所述的菌剂在黑水虻处理畜禽粪便中的应用。