[发明专利]一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法

权利要求书

1.一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤1、首先将带有叔胺或季胺的乙烯基单体和带有氨基、羧基、巯基的端基功能化合物混合，再加入引发剂进行聚合，得到端基具有反应活性的聚叔胺或季胺的预聚长链功能配基；其中，所得到的预聚长链功能配基的主链上除带有叔胺或季胺功能基团外，端基还含有氨基、羧基、巯基功能基团；

步骤2、将步骤1得到的预聚长链功能配基化学键合至多孔微球的表面，制备得到高载量阴离子交换层析介质。

2.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，所述步骤2的过程具体为：

将步骤1得到的预聚长链功能配基通过端基的氨基、羧基、巯基功能基团与多孔微球表面的基团反应；

在将所述预聚长链功能配基接枝至所述多孔微球表面时，所述预聚长链功能配基通过一端定点偶联至所述多孔微球表面，在带有功能基团R₁的多孔微球表面及孔道表面进行接枝反应；其中的功能基团R₁包括胺基、环氧基、羧基，该功能基团R₁分别与预聚长链功能配基的端基R2进行反应，端基R2包括胺基、巯基、羧基；

所述端基R2分别与所述功能基团R₁的羧基、环氧基、胺基发生偶联反应，将带有端基R2的预聚长链功能配基通过端基固定于多孔微球表面，因端基R2的基团仅位于预聚物的末端，最后预聚长链功能配基直立于制得的阴离子交换层析介质的表面及孔道表面，具有更好的伸展状态，接枝后的多孔微球表面的离子交换基团数量增加，离子交换容量提高，从而增加了大孔微球的蛋白结合载量。

3.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，在步骤1中，所述带有叔胺或季胺的乙烯基单体包括甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、丙烯酸二甲氨基乙酯、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，在步骤1中，所述带有氨基、羧基、巯基的端基功能化合物包括乙二胺、二乙烯三胺、三乙烯四胺、四乙烯五胺、亚胺基二乙酸、半胱氨酸、胱氨酸、乙二胺四乙酸中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，在步骤1中，所加入的引发剂包括过硫酸钾、过硫酸铵、硝酸铈铵、硫酸铈铵中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，在步骤1中，

所述带有叔胺或季胺的乙烯基单体、带有氨基、羧基、巯基的端基功能化合物、引发剂的用量比例范围为：100:5:1-200:5:1。

7.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，在步骤2中，所述多孔微球的孔道表面带有能与氨基、羧基、巯基反应的功能基团，具体包括环氧基、胺基、羧基中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，

所述多孔微球的孔径范围为30-3000nm，粒径范围为20-200um，操作压力耐受范围为0.3-10MPa。

9.根据权利要求7所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，

所述多孔微球的基质包括聚丙烯酸酯类、聚苯乙烯类、多糖类材料。

10.根据权利要求1所述高载量阴离子交换层析介质的制备方法，其特征在于，

所制备得到的阴离子交换层析介质的离子交换容量范围为0.1-4.0mmol/mL；

所制备得到的阴离子交换层析介质的蛋白结合载量范围为30-150mg/mL。