[发明专利]一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法

说明书

本发明公开了一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法，首先将带有叔胺或季胺的乙烯基单体和带有氨基、羧基、巯基的端基功能化合物混合，再加入引发剂进行聚合，得到端基具有反应活性的聚叔胺或季胺的预聚长链功能配基；再将得到的预聚长链功能配基化学键合至多孔微球的表面，制备得到高载量阴离子交换层析介质。该方法制备过程操作简便易行、适用范围广，降低了介质制备成本，提高了分离纯化效率。

技术领域

本发明涉及层析介质制备及应用技术领域，尤其涉及一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法。

背景技术

生物制药生产规模日益扩大，对其下游的分离纯化提出了新的挑战，发展快速高效的纯化方法是当务之急。层析分离是当前的主流纯化技术之一，其中分离介质是分离纯化技术的核心，提高分离介质的载量，可以显著降低纯化工艺中的料液处理体积、节约流动相的使用量、节省分离介质使用量以及操作空间，减少大型设备的购置和使用，因此提高分离介质的载量对于提高分离效率、降低生产成本有重要作用。

阴离子交换层析介质是当前蛋白类药物纯化过程中应用最为广泛的介质之一，主要是由于天然蛋白大多数其等电点小于7，在通常的中性条件下，其表面带有负电荷而易于和阴离子交换介质相结合，因此提高阴离子交换层析介质的载量对于提高蛋白纯化效率具有重要意义。多孔微球表面键合多胺基的物质，可提高阴离子介质的耐盐性，但现有技术所采用的方法多为将具有多胺基的化合物随机偶联至材料表面，同时其制备过程衍生步骤多，操作繁琐，每步需要原料用量过量等，制备成本较高；另外现有技术方案所制备的产品引入的基团多为伯胺、仲胺或与叔胺的混合物，聚合物链在材料表面呈伏倒状态，其载量提升有限。

发明内容

本发明的目的是提供一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法，该方法制备过程操作简便易行、适用范围广，解决了大孔聚合物层析介质比表面积小、载量低的问题。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种高载量阴离子交换层析介质的制备方法，所述方法包括：

步骤1、首先将带有叔胺或季胺的乙烯基单体和带有氨基、羧基、巯基的端基功能化合物混合，再加入引发剂进行聚合，得到端基具有反应活性的聚叔胺或季胺的预聚长链功能配基；其中，所得到的预聚长链功能配基的主链上除带有叔胺或季胺功能基团外，端基还含有氨基、羧基、巯基功能基团；

步骤2、将步骤1得到的预聚长链功能配基化学键合至多孔微球的表面，制备得到高载量阴离子交换层析介质。

由上述本发明提供的技术方案可以看出，上述方法制备过程操作简便易行、适用范围广，解决了大孔聚合物层析介质比表面积小、载量低的问题，所制备的阴离子交换层析介质的蛋白载量更高，适合生物大分子的快速分离纯化。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。

图1为本发明实施例提供的高载量阴离子交换层析介质的制备方法流程示意图；

图2为本发明实施例所述接枝聚合物功能配基的反应过程示意图；

图3为本发明实施例所述阴离子交换层析介质的电子扫描显微示意图。

具体实施方式

下面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，这并不构成对本发明的限制。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。

如图1所示为本发明实施例提供的高载量阴离子交换层析介质的制备方法流程示意图，所述方法包括：