[发明专利]铵盐溶液、高铁二胺-阿利辛蓝染色液及其应用

说明书

本发明涉及铵盐溶液、高铁二胺‑阿利辛蓝染色液及其应用，属于医学检测技术领域。本发明的铵盐溶液中加入有金属离子螯合剂，由于金属离子螯合剂可以螯合溶液中的金属离子，减少氧自由基的释放，抑制和减缓N,N‑二甲基‑对‑苯二胺二盐酸盐的变色反应，从而可以更好地保护N,N‑二甲基‑间‑苯二胺二盐酸盐，提高铵盐溶液的储存稳定性，明显改善铵盐溶液长期保存时存在颜色加深或变黑的问题。另外，当铵盐溶液用于高铁二胺‑阿利辛蓝染色液时，不影响染色液在病理组织中的染色效果，且背景干净，染色特异性良好。

技术领域

本发明涉及铵盐溶液、高铁二胺-阿利辛蓝染色液及其应用，属于医学检测技术领域。

背景技术

高铁二胺-阿利辛蓝染色液，又称黏液HID-AB染色液，主要由高铁二胺溶液和阿利新蓝染色液等组成，可以染色酸性黏蛋白、蛋白多糖、透明质酸等物质，使酸性黏蛋白(硫酸化酸性黏液物质)呈棕紫色至棕黑色，唾液酸性黏液物质(蛋白多糖、透明质酸)呈蓝色，进而区分硫黏蛋白和蛋白多糖。因此，高铁二胺-阿利辛蓝染色液主要用于鉴别硫酸化酸性黏液物质和唾液酸性粘液物质。

高铁二胺-阿利辛蓝染色液的染色原理在于高铁二胺盐中的二铵盐与硫酸化酸性黏液物质结合，形成复合物而被显色。在pH值大大低于2.5时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色，硫酸化酸性黏液物质等形成棕紫色至棕黑色。在pH值＝2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的组织(如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白等唾液酸性黏液物质)染色，唾液酸性黏液物质等形成蓝色。

高铁二胺溶液包括N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐溶液(HID-A液)、N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐溶液(HID-B液)和氯化铁溶液，N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐和N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐均为铵盐，解离后都带正电荷，二铵盐与硫酸化酸性粘液物质结合成复合物而被显色，该反应很慢，氯化铁作为催化剂可提高反应速度。氯化铁一方面使二胺盐氧化形成棕黑色的阳离子色原，从而加快染色；另一方面使染色液的pH降至1.4，在此pH值时，切片上的羧基不能与二胺盐结合而仅是硫酸根与二胺盐起反应形成紫棕至棕黑色的复合物。N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐溶液在放置较长时间时，其颜色由无色逐渐变深，造成高铁二胺-阿利辛蓝染色液的染色效果减弱并且会使染色组织中存在杂色。

发明内容

本发明的目的在于提供一种铵盐溶液，可以解决目前高铁二胺-阿利辛蓝染色液中的N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐溶液存在放置较长时间时易变色从而影响高铁二胺-阿利辛蓝染色液的染色效果以及使染色组织中存在杂色的问题。

本发明的第二个目的在于提供一种高铁二胺-阿利辛蓝染色液。

本发明的第三个目的在于提供一种高铁二胺-阿利辛蓝染色液在硫酸化酸性粘液物质和唾液酸性粘液物质的鉴别染色中的应用。

为了实现上述目的，本发明的铵盐溶液所采用的技术方案为：

一种铵盐溶液，所述铵盐溶液主要由N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐、金属离子螯合剂和水制成；或者所述铵盐溶液主要由N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐、N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐、金属离子螯合剂和水制成；所述金属离子螯合剂为乙二胺四乙酸二钠。

本发明的铵盐溶液中加入有金属离子螯合剂，由于金属离子螯合剂可以螯合溶液中的金属离子，减少氧自由基的释放，抑制和减缓N,N-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐的变色反应，从而可以更好地保护N,N-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐，提高铵盐溶液的储存稳定性，明显改善铵盐溶液长期保存时存在颜色加深或变黑的问题。另外，当铵盐溶液用于高铁二胺-阿利辛蓝染色液时，不影响染色液在病理组织中的染色效果，且背景干净，染色特异性良好。并且实验结果证明，当金属离子螯合剂为乙二胺四乙酸二钠时，可以提高铵盐溶液的储存稳定性并且可以使制备的铵盐溶液用于高铁二胺-阿利辛蓝染色液时，不影响染色液在病理组织中的染色效果。