[发明专利]一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法

说明书

本发明公开了一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，属于药物分析技术领域。包括以下步骤：1)配置供试品溶液和对照溶液；2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，规格为250mm×4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃，以缓冲盐为流动相A，以甲醇、乙腈混合溶液为流动相B；流速为1.2mL/min进行梯度洗脱；3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；使用该高效液相色谱法能够快速、有效、准确和可靠的分离检测出氯氮平原料药中有关物质，有利于提高氯氮平原料药的产品质量，提高患者用药安全性。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法。

背景技术

氯氮平作为新型抗精神病药，疗效高，收效快，锥体外系症状轻。作用与吩噻嗪类类似，有较强的抗精神病作用。且其作为广谱神经安定药，起效迅速，多在1周内见效，对其他药无效的病例仍然有效。氯氮平不仅对精神病阳性症状有效，对阴性症状也有一定效果。

根据氯氮平工艺路线，在制备过程中有起始物料(2，5-二氯硝基苯、邻氨基苯甲酸)，中间体(缩合物、还原物)，终产品可能有工艺杂质A、B、C、D。目前对上述杂质分离测定的相关文献报道极少，因此，提供一种测定氯氮平原料药中杂质含量的方法对于原料制剂的生成和贮存具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种利用HPLC测定丙硫异烟胺中杂质含量的方法。

为了解决上述问题，本发明采用的技术方案为：

一种利用HPLC测定氯氮平原料药中杂质含量的方法，包括以下步骤：

1)配置供试品溶液和对照溶液；

2)设置高效液相检测条件：色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂，规格为250mm×4.6mm，填料粒径为5μm，柱温为35℃，以缓冲盐为流动相A，以甲醇、乙腈混合溶液为流动相B；流速为1.2mL/min进行梯度洗脱；

3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；

所述供试品溶液的制备是方法为：精密称定氯氮平，加稀释剂溶解并稀释成每毫升含氯氮平0.5mg的溶液作为供试品溶液；

所述对照品溶液的制备方法为：取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D及氯氮平对照品各12.5mg，精密称定，置不同50mL量瓶中，用稀释剂溶解并稀释至刻度，作为对照品储备液I，精密量取5mL杂质A和氯氮平对照品储备液I，10mL杂质B和杂质D对照品储备液I，15mL杂质C对照品储备液I，置同一100mE量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品储备液II；精密量取2mL对照品储备液II，置50mL量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，作为对照品溶液。

进一步地，所述的稀释剂为甲醇∶水＝80∶20。

进一步地，步骤2)中所述的缓冲盐为2g/L磷酸二氢钾，用磷酸调节pH至2.4。

进一步地，步骤2)中所述的流动相B中甲醇∶乙腈＝45∶55。

进一步地，步骤2)中，所述梯度洗脱的条件为：0-30min，流动相A的体积百分比由80％降至10％，流动相B的体积百分比由20％升至90％。

进一步地，步骤3)中，所述供试品溶液与对照溶液的进样量分别为20μL。

进一步地，步骤3)中，所述液相色谱仪的紫外检测器的的检测波长为257nm。