[发明专利]VI-E型和VI-F型CRISPR-Cas系统及其用途在审
| 申请号： | 202211635404.9 | 申请日： | 2020-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN116590257A | 公开（公告）日： | 2023-08-15 |
| 发明（设计）人： | 杨辉;胥春龙;周英思;肖庆全 | 申请（专利权）人： | 辉大(上海)生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/113;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 陈文平;徐志明 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新区自由*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | vi crispr cas 系统 及其 用途 | ||
1.一种CRISPR-Cas复合物，所述CRISPR-Cas复合物包含：
(1)RNA指导序列，其包含能够与靶RNA杂交的间隔序列以及在所述间隔序列的3'的同向重复序列；和
(2)Cas，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；
其中所述Cas能够(i)与所述RNA指导序列结合，并且(ii)靶向所述靶RNA，
条件是当所述CRISPR-Cas复合物包含所述Cas时，所述间隔序列与天然存在的噬菌体核酸不是100％互补。
2.如权利要求1所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述同向重复序列具有与SEQ ID NO:10的二级结构基本相同的二级结构。
3.如权利要求1所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述同向重复序列由SEQ ID NO:10编码。
4.如权利要求1-3中任一项所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述靶RNA由真核DNA编码。
5.如权利要求1-3中任一项所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述间隔序列在15-60个核苷酸之间。
6.如权利要求1-3中任一项所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述间隔序列在25-50个核苷酸之间。
7.如权利要求1-3中任一项所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述间隔序列为约30个核苷酸。
8.如权利要求1-3中任一项所述的CRISPR-Cas复合物，其中所述间隔序列与所述靶RNA是90％-100％互补。
9.一种修饰靶RNA的方法，所述方法包括使所述靶RNA与如权利要求1-8中任一项所述的CRISPR-Cas复合物接触，其中所述间隔序列与所述靶RNA的至少15个核苷酸互补；其中所述Cas与所述RNA指导序列缔合以形成所述复合物；其中所述复合物与所述靶RNA结合；并且其中在所述复合物与所述靶RNA结合后，所述Cas修饰所述靶RNA。
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