[发明专利]基于LAMP的核酸检测微芯片及制备使用方法

权利要求书

1.基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述核酸检测微芯片包括基础层、样品层和间隔层，所述基础层、样品层和间隔层依次使用粘合、固化和干燥后得到。

2.根据权利要求1所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述样品层为适配于最大可能数计算的多排、相互独立多个样品孔组合而成。

3.根据权利要求2所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述样品孔为圆孔，所述样品孔的直径为0.8-1.5毫米，所述样品孔以矩阵形式排列，所述样品孔之间间距为1.5-2.5毫米。

4.按照权利要求1所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述基础层、样品层和间隔层均由PMMA材料制成，所述PMMA为聚甲基丙烯酸甲酯，PMMA板先通过激光切割后，然后用70％的乙醇清洗，干燥后得到所述基础层、样品层和间隔层。

5.按照权利要求4所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述基础层为白色，所述基础层的厚度为1.5-3mm，所述样品层和所述间隔层均为透明色，所述样品层和所述间隔层的厚度均为0.8-1.5mm。

6.按照权利要求1所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述核酸检测微芯片使用紫外固化光学胶NOA65粘合固化，并在长波紫外线下暴露5-6min。

7.根据权利要求1所述的基于LAMP的核酸检测微芯片，其特征在于：所述核酸检测微芯片的干燥温度为50-70℃，所述核酸检测微芯片的干燥时间为8-24h。

8.基于LAMP的核酸检测微芯片的制备使用方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)先将核酸检测微芯片设计适配于最大可能数计算，然后将符合设计的基础层、样品层和间隔层组合得到所述核酸检测微芯片；

(2)将梯度稀释后LAMP样品加入所述样品层的样品孔中，进行环介导等温扩增反应，根据不同梯度稀释阴性或阳性数，所述阴性或阳性数的结果进行最大可能数计算，作为核酸定量检测，得到定量核酸浓度。

9.按照权利要求8所述的基于LAMP的核酸检测微芯片的制备使用方法，其特征在于：根据不同梯度稀释阴性或阳性数的方式为连续梯度稀释过程进行4-7次，稀释倍数为2-10倍。

10.根据权利要求8所述的基于LAMP的核酸检测微芯片的制备使用方法，其特征在于：以所述环介导等温扩增反应的反应示色染料为终点指示，所述环介导等温扩增反应的反应时间为20-45min，所述环介导等温扩增反应的温度为60-65℃。