[发明专利]一种靶向条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体、其制备方法及其应用有效
申请号: | 202211704463.7 | 申请日: | 2022-12-29 |
公开(公告)号: | CN116284423B | 公开(公告)日: | 2023-10-03 |
发明(设计)人: | 姜啸风;郑飞剑;王玉芳 | 申请(专利权)人: | 江苏百英生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/42 | 分类号: | C07K16/42;C07K16/06;C07K1/22;C07K16/28;G01N33/68;C40B30/04 |
代理公司: | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人: | 卢霞 |
地址: | 225300 江苏省泰州市泰州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 靶向 条纹 斑竹 ignar ch1 克隆 抗体 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体,其特征在于:所述的多克隆抗体是用氨基酸序列如SEQ ID No:1所示的合成多肽与KLH耦联得到的免疫原免疫动物后得到。
2.如权利要求1所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,
S1.制备合成多肽;所述多肽序列来源于条纹斑竹鲨IgNAR-CH1,为保守片段序列,其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示,多肽氨基酸序列为YSCQVSHSAT;
S2. 将步骤S1中制备的多肽与KLH耦联,多肽与KLH的重量比为1:1,制备免疫原,按比例混合后注射入免疫动物的体内,得到Ig NAR-CH1多克隆抗体血清;
S3.对Ig NAR-CH1多克隆抗体血清进行亲和纯化,得到多克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S2的具体过程为:
S21.初次免疫:将免疫原与弗氏完全佐剂混合,使用均质机乳化充分,形成油包水的乳浊液,滴入冰水中五分钟不分散,即得免疫所用注射剂,皮下注射入免疫动物体内;
S22.加强免疫:将免疫原与弗氏不完全佐剂混合,使用均质机乳化充分,形成油包水的乳浊液,滴入冰水中五分钟不分散,即得免疫所用注射剂,皮下注射入免疫动物体内,进行加强免疫若干次;
S23.最后一次免疫后,免疫动物颈动脉取血,收集得到靶向IgNAR-CH1的多克隆抗体血清。
4.根据权利要求3所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述免疫原与弗氏完全佐剂以1:1等体积混合乳化,所述免疫原与弗氏不完全佐剂也以1:1等体积混合乳化;所述初次免疫的免疫剂量为1 mg/只,所述加强免疫的免疫剂量为0.5mg/只;初次免疫后进行2次加强免疫,间隔1周免疫1次,最后一次免疫7~10天后采用颈动脉取全血。
5.根据权利要求2所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体的制备方法,其特征在于:所述步骤S2中,所述的免疫动物为新西兰大白兔。
6.如权利要求1所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体或如权利要求2-5任一项所述方法制备的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体在检测条纹斑竹鲨血清效价中的应用。
7.如权利要求1所述的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体或如权利要求2-5任一项所述方法制备的条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体在检测鉴定抗体类型、噬菌体文库建库筛选的研究及质量检测方面的应用。
8.一种合成多肽,其特征在于,序列来源于条纹斑竹鲨IgNAR-CH1,为保守片段序列,其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示,具体序列为YSCQVSHSAT。
9.如权利要求8所述的合成多肽在制备条纹斑竹鲨IgNAR-CH1多克隆抗体中的应用。
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