[发明专利]茶碱检测试剂盒在审
申请号: | 202310257027.8 | 申请日: | 2019-12-26 |
公开(公告)号: | CN116144619A | 公开(公告)日: | 2023-05-23 |
发明(设计)人: | 龚俊;祁金祥;雷志;张启飞;王贵利;刘希 | 申请(专利权)人: | 北京九强生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;G01N21/31;G01N35/00 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟;程云 |
地址: | 100083 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 茶碱 检测 试剂盒 | ||
1.一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体,其中:
相较于野生型6-磷酸葡萄糖脱氢酶,所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体包含选自以下的一个突变:D306C、D375C、G426C;
所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体是选自以下的任一序列所示:SEQ ID No.2、SEQ IDNo.3、SEQ ID No.4。
2.一种茶碱检测试剂盒,其包含:
第一试剂,所述第一试剂包含底物、茶碱抗体;
第二试剂,所述第二试剂包含偶联物;
所述偶联物是6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体与茶碱衍生物偶联而成;
所述茶碱衍生物是式I所示:
所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体是权利要求1所述的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体。
3.根据权利要求2所述的茶碱检测试剂盒,其还包含:
校准品,所述校准品包含10mM至500mM缓冲液、0mg/L至40mg/L茶碱。
4.根据权利要求2或3所述的茶碱检测试剂盒,其还包含:
质控品,所述质控品包含10mM至500mM缓冲液、0mg/L至40mg/L茶碱。
5.根据权利要求2所述的茶碱检测试剂盒,其包含:
第一试剂,其包含:
10mM至500mM,优选100mM至300mM缓冲液、
5mM至20mM,优选10mM至15mM底物、
0.1mg/L至10mg/L,优选4mg/L至6mg/L茶碱抗体、
10mM至300mM,优选150mM至200mMNaCl、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L稳定剂、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L表面活性剂、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L防腐剂;
第二试剂,其包含:
10mM至500mM,优选100mM至300mM缓冲液、
0.1mg/L至1mg/L所述偶联物、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L稳定剂、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L表面活性剂、
0.1g/L至5g/L,优选1g/L至5g/L防腐剂;
所述缓冲液选自以下的一种或组合:氨基丁三醇缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、巴比妥缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、三羟甲基甲烷缓冲液;优选,磷酸盐缓冲液;
所述缓冲液的pH为7至8,优选7至7.5;
所述稳定剂选自以下的一种或组合:牛血清白蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖、甘露醇、甘氨酸、精氨酸、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000;优选牛血清白蛋白;
所述表面活性剂选自以下的一种或组合:Brij35、Tritiom X-100、Tritiom X-405、Tween20、Tween30、Tween80、椰子油脂肪酸二乙醇酰胺、AEO7,优选Tween20;
所述防腐剂选自以下的一种或组合:叠氮化物、MIT、PC-300、硫柳汞;
所述叠氮化物选自:叠氮钠、叠氮锂;
所述底物包含:6-磷酸葡糖糖、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
6.根据权利要求2所述的茶碱检测试剂盒,其包含:
第一试剂,其包含:
100mM PB缓冲液,pH 7.2、
15mM 6-磷酸葡萄糖、
15mMβ-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、5.7mg/L的茶碱抗体、
150mM NaCl、
1g/L牛血清白蛋白、
1g/L Tween20、
1g/L叠氮钠;
第二试剂,其包含:
100mM PB缓冲液,pH 7.2、
0.1mg/L所述偶联物、
1g/L牛血清白蛋白、
1g/L Tween20、
1g/L叠氮钠。
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