[发明专利]磷脂酰胆碱在制备促进猪FAPs细胞分化聚脂制剂中的应用

权利要求书

1.磷脂酰胆碱在制备促进猪FAPs细胞分化聚酯制剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂中磷脂酰胆碱单独作为有效成分。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述制剂中还包括辅料。

4.一种细胞培养肉的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)制备海藻酸钠/明胶3D凝胶球

将0.5g海藻酸钠和0.5g明胶溶于50mL蒸馏水中，得到浓度为2％的海藻酸钠/明胶混合溶胶，取1g氯化钙溶于50mL蒸馏水中，得到浓度为2％的氯化钙溶液，将海藻酸钠/明胶混合溶胶逐滴加入氯化钙溶液，交联5-15min可得到海藻酸钠/明胶3D凝胶球；

(2)在海藻酸钠和海藻酸钠/明胶3D支架上接种FAPs细胞

在细胞培养板中加入氯化钙溶液，将猪FAPs细胞悬液与海藻酸钠/明胶混合溶胶按照体积比1：1～3混合均匀，逐滴滴入氯化钙溶液中，交联5-15min形成凝胶球；弃去剩余氯化钙溶液，补充生长培养基，在37℃、5％CO₂环境中培养，后进行成脂分化培养，成脂分化培养过程中添加1-100μM PC，最终获得细胞培养肉。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中还包括将海藻酸钠溶液、明胶溶液和氯化钙溶液分别于98℃下加热3h，紫外照射3h灭菌，氯化钙溶液经0.22μm滤膜过滤。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中猪FAPs细胞于37℃、5％CO₂培养箱中培养至细胞汇合率达到75-85％时，通过胰蛋白酶消化和离心获得猪FAPs细胞悬液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中猪FAPs细胞悬液的浓度为1.5×10⁵cell/ml。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中交联时间为10min。