[发明专利]一种转化合成酪醇的苯丙酮酸脱羧酶突变体及其应用在审
| 申请号： | 202310575370.7 | 申请日： | 2023-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN116622688A | 公开（公告）日： | 2023-08-22 |
| 发明（设计）人： | 夏媛媛;齐丽娜;是徐蕾;陈献忠;杨海泉;沈微 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 转化 合成 丙酮酸 脱羧酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种高活性苯丙酮酸脱羧酶突变体，其特征在于，在氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的亲本酶ARO10的基础上，进行了如下任一种突变：
(1)将第331位的天冬氨酸突变为丝氨酸；
(2)将第331位的天冬氨酸突变为缬氨酸；
(3)将第331位的天冬氨酸突变为半胱氨酸。
2.编码权利要求1所述苯丙酮酸脱羧酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的重组载体。
4.表达权利要求1所述的苯丙酮酸脱羧酶突变体，或含有权利要求2所述基因，或含有权利要求3所述重组载体的重组微生物细胞。
5.如权利要求4所述的重组微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞为细菌细胞或者真菌细胞。
6.一种重组大肠杆菌，其特征在于，表达了权利要求1所述的苯丙酮酸脱羧酶突变体。
7.根据权利要求6所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以大肠杆菌BL21(DE3)、大肠杆菌MG1655或大肠杆菌CCTCC NO：M2019390为宿主细胞；以pEtac或pkk223-3为表达载体。
8.一种生产酪醇的方法，其特征在于，将权利要求6所述的重组大肠杆菌在含有葡萄糖的培养基中发酵。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述发酵是在M9Y液体培养基中，于28～32℃发酵至少48h。
10.权利要求1所述的苯丙酮酸脱羧酶突变体，或权利要求6所述的重组大肠杆菌，或权利要求8～9任一所述方法在制备酪醇及含有酪醇的产品中的应用。
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