[发明专利]人NT-proBNP特异性单克隆抗体制备方法和应用

权利要求书

1.一种结合蛋白，其具有抗原结合结构域，所述抗原结合结构域能够特异性结合NT-proBNP的第66至76位氨基酸区域且不能结合proBNP，或者所述抗原结合结构域能够特异性结合NT-proBNP的第5至27位氨基酸区域且还能特异性结合proBNP。

2.根据权利要求1所述的结合蛋白，其中，所述抗原结合结构域选自如下抗原结合结构域a和抗原结合结构域b中的一种；

其中，

抗原结合结构域a包含如下至少一个CDR：

CDR1-VH：序列如SEQ ID NO.10所示，或者与SEQ ID NO.10所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR2-VH：序列如SEQ ID NO.11所示，或者与SEQ ID NO.11所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR3-VH：序列如SEQ ID NO.12所示，或者与SEQ ID NO.12所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR1-VL：序列如SEQ ID NO.13所示，或者与SEQ ID NO.13所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR2-VL：序列如SEQ ID NO.14所示，或者与SEQ ID NO.14所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR3-VL：序列如SEQ ID NO.15所示，或者与SEQ ID NO.15所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

抗原结合结构域b包含如下至少一个CDR：

CDR1-VH：序列如SEQ ID NO.4所示，或者与SEQ ID NO.4所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR2-VH：序列如SEQ ID NO.5所示，或者与SEQ ID NO.5所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR3-VH：序列如SEQ ID NO.6所示，或者与SEQ ID NO.6所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR1-VL：序列如SEQ ID NO.7所示，或者与SEQ ID NO.7所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR2-VL：序列如SEQ ID NO.8所示，或者与SEQ ID NO.8所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

CDR3-VL：序列如SEQ ID NO.9所示，或者与SEQ ID NO.9所示序列相比具有一个或者多个氨基酸插入、替换或缺失；

可选地，氨基酸插入、替换或缺失的数量不超过3个，优选为1个；

进一步可选地，所述替换为保守性氨基酸替换。

3.根据权利要求2所述的结合蛋白，其中，所述结合蛋白具有至少3个CDR；

可选地，所述结合蛋白包括6个CDR。

4.根据权利要求1至3任一项所述的结合蛋白，其为抗体、抗体的抗原结合片段或者小模块免疫药物；

可选地，所述结合蛋白为单克隆抗体、F(ab’)₂片段、Fab’片段、Fab片段、Fv片段、scFv片段、线性抗体、多特异性抗体、微型抗体、螯合重组抗体、内抗体、纳米抗体、结合结构域免疫球蛋白融合蛋白、小模块免疫药物、骆驼化抗体或者含有VHH的抗体。

5.根据权利要求1至3任一项所述的结合蛋白，其还包括重链骨架区和/或轻链骨架区；

可选地，所述重链骨架区和/或所述轻链骨架区包含来源于人的抗体骨架区序列；

进一步可选地，所述重链骨架区和所述轻链骨架区的序列全部为来源于人的抗体骨架区序列。

6.根据权利要求1至3任一项所述的结合蛋白，其还包含抗体恒定区；

可选地，所述抗体恒定区的序列选自IgG、IgA、IgM、IgE及IgD任何其中之一恒定区的序列；

进一步可选地，所述抗体恒定区的种属来源为牛、马、猪、羊、大鼠、小鼠、豚鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅或者人；

更进一步可选地，所述抗体恒定区来源于人。