[发明专利]一种短柄镰刀菌的PCR检测方法及其应用在审
| 申请号： | 202310611078.6 | 申请日： | 2023-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN116377119A | 公开（公告）日： | 2023-07-04 |
| 发明（设计）人： | 汪华;刘军;常威;邓思怡 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11;C12Q1/686;C12R1/77 |
| 代理公司： | 北京中睿智恒知识产权代理事务所(普通合伙) 16025 | 代理人： | 黄莉 |
| 地址： | 430000 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 镰刀 pcr 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于短柄镰刀菌PCR检测的引物组，其特征在于，所述引物组包括上游引物和下游引物；所述上游引物的序列如SEQ ID NO.1所示；所述下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种检测短柄镰刀菌的试剂，其特征在于，所述试剂含有权利要求1中所述的引物组。
3.一种检测短柄镰刀菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求1中所述的引物组或权利要求2中所述的试剂。
4.一种短柄镰刀菌的PCR鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法以样品总DNA为模板，利用权利要求1所述的引物组进行PCR扩增，反应结束后根据琼脂糖凝胶电泳判定结果。
5.根据权利要求4所述的PCR鉴定方法，其特征在于，PCR的反应程序为：94℃预变性5min；进入循环，94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；最后延伸72℃10min。
6.根据权利要求5所述的PCR鉴定方法，其特征在于，PCR反应体系总体积25ul，其中包括：2.5μL 10×PCR缓冲液，1.5μL 25mM Mg2+，2μL 10mM dNTP，0.125ul 5U/μL Taq DNA聚合酶，浓度为10μM的上游引物SEQ ID NO.1 1μL，浓度为10μM的下游引物SEQ ID NO.2 1μL，DNA模板1μL，ddH2O 15.875μL。
7.根据权利要求6所述的PCR鉴定方法，其特征在于，所述DNA模板提取自番茄。
8.权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂或权利要求3所述的试剂盒在鉴定短柄镰刀菌中的应用。
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