[发明专利]抗神经节苷酯单克隆抗体及其在恶性肿瘤特异性免疫治疗中的应用

说明书

本发明与免疫学领域相关，特别是和选出抗神经节苷脂单克隆抗体(Ab1′s)，此抗体具有特异性，有再发的独特表位并且具有对这些抗原的免疫反应作为免疫调节因子的价值。本专利进一步与获得用上述抗神经节苷脂单克隆抗体免疫而产生抗独特型单克隆抗体(Ab2s)有关。

神经节苷脂是含唾液酸的糖神经鞘脂，它可在大部分哺乳动物细胞表面表达。虽然这些抗原存在于正常组织当中，但在大量存在时，它们才能被发现，并且在恶性细胞表面以不同的组织结构形式表达(Hakomori，s.(1985)，Cancer Res.45，2405-2414；Miraldi，F.(1989)Seminars in Nuclear Medicine XIX，282-294；Hamil-ton，et al(1993)Int，J.Cancer 53，1-8)。

正常成熟的组织仅含有NeuAc，但不含有带有神经节苷脂NeuGc。

已经报道一些人类肿瘤包括黑色素瘤，结直肠癌，视网膜神经胶质瘤和非精胚产生的细胞瘤都有带有神经节苷脂的N-羟乙酰基神经氨酸，但是组成当中的唾液酸含量不足0.05％(Higachi，H.etal(1984)JPn J Cancer Res(Gann)75，1025-1029；Higachi，H.et al(1985)Cancer Res(Gann)78.1614-1620；Higachi.H.et al(1988)Jpn J Cancer Res(Gann)79，952-956；Miyake，M.et al(1990)Cancer 65.499-505)。

其他作者已经证明对于这些抗原的人单克隆抗体不识别任何结直肠癌或已研究的黑色素瘤(Furukawa K.et al(1988)J Biol.Chem.265，18507-18512)。

在乳腺癌中神经节苷脂的含量研究已证明，含有神经节苷脂的NeuGc大约占整个神经节苷脂总量的5-11％(专利申请131-93)。

神经节苷脂不是很好的免疫原，为了引发免疫反应，它们必须结合到蛋白上，或与质脂体或minnesota沙门氏R595菌株混合。对这些抗原反应的抗体特征之一是所产生的免疫球蛋白主要是IgM类。

虽然在人和鼠当中，也能发现IgG类抗神经节苷脂抗体，但是与T细胞的协同反应似乎是非特异性的并且需要有佐剂的诱导。所以每次免疫后而引起的抗体反应是短周期的，并有较低的效价(Liv-ing ston.P.o.(1991)Immunologz and Alergy Clinics of NorthAmeriCan 11，401-425；Portoukalian.J.et al(1991)Int.J.Cancer49，893-899)，也是一个典型的T细胞非依赖性抗原反应(Liv-in-gston.)P.O.et al(1982)Proc.Natl.Acad.Sci USA 84 J911-2915；Tai.J.et al(1985)Int J.Cancer 35.607-612；Livingston.P.O.etal(1989)Cancer Res，49，7045-7050)。