[发明专利]增大包封量的脂质体

说明书

技术领域

本发明涉及新的脂质体制剂，其悬浮液及其制备方法，并尤其涉及能够包容大量水溶性非电解质药物的脂质体及其悬浮液。

相关技术

脂质体是能包封水相(称作内水相)的，包含单层或多层脂质膜的囊，并且，因为它们能将药物保持在脂质膜内，与外水相分离，所以人们热心地研究，将它作为药物释放系统。脂质体可以包封各种药物，包括高分子量的药物，即包括脂溶性药物和水溶性药物。

脂溶性药物因其与脂质体脂质膜的亲和性而容易包封在脂质体中。另一方面，在水溶性药物中，水溶性电解质药物通过药物电荷与带有相反电荷的磷脂之间的静电作用(日本特许申请号2-187370)或通过脂质体外相和内相之间的pH梯度(WPI 88-271022/38)，可有效地包封在脂质体内水相中。

然而，包封药物的量仍然不是令人满意的。而且，如使用该静电作用法，药物被限制为与“带电”磷脂电荷相反的药物，并且，如果药物带有与使用磷脂相同的电荷，那么，所使用药物在脂质体中的包封比是很低的。而且，如果药物是水溶性非电解质物质，那么不能应用上述方法，因此，有效地将水溶性非电解质药物包封在脂质体中还不是容易的。

作为有效地将水溶性非电解质包封在脂质体内水相的方法，推荐反相蒸发法(Proc Natl.Acad.Sei.USA，Vol.75(9).P4194，1978)，醚注射法(出处同上，Vol.443，P629，1975)等等。然而，因为该方法使用具有低燃点的醚，所以这些方法不能用于工业上大量生产脂质体。由这些方法生产的脂质体为单层脂质体。与多层脂质体比，单层脂质体回缩，因此给予后，在血中的稳定性低。

进一步WO 88/09165中公开了包封水溶性非电解质药物的脂质体，但包封率很低。

本发明公开

因此，本发明提供包含多层脂质体，能够包封或容纳大量水溶性药物，特别是水溶性非电解质药物或具有与磷脂相同电荷药物的脂质体制剂。

经过大量研究，本发明者发现，以特定比例应用符合预先测定条件的中性磷脂和符合预先测定条件的带电磷脂，制备能在内水相中容纳大量水的脂质体，因此完成了本发明。

因此，本发明提供包含多层脂质体的脂质体制剂，其特点是由含有基本饱和脂肪酸基的中性磷脂和含有基本饱和脂肪酸基的带电磷脂来制备脂质体膜，其中，中性磷脂和带电磷脂的重量比为200∶1-3∶1，脂质体的加权平均颗粒直径为50nm-3,000nm，并且脂质体的包封量(内水相(体积)/脂质体(重量))至少为5ml/g。

因此，本发明提供内水相包封量大并因此能容纳大量水溶性药物，特别是水溶性非电解质药物并在血中和贮存期间稳定的脂质体制剂。实现本发明的最佳方案

制备本发明脂质体膜的必需组分之一是含有基本饱和脂肪酸基的中性磷脂。通常，在磷脂中饱和脂肪酸基的碳原子数至少为14，优选至少为15并且更优选至少为16。如果饱和脂肪酸基中碳原子数小于14，那么脂质体容纳内水相的能力降低并且给予后，脂质体在血中的稳定性降低。另一方面，通常，如果在脂肪酸基中碳原子的数为28或更多，生物相容性降低，并且在生产脂质体过程中需要非常高的温度。

术语“基本饱和的”指完全饱和的脂肪酸(不含c-c双键)，或脂肪酸不饱和程度很低。因为脂肪酸基是基本饱和的，所以，整个中性磷脂的不饱和程度，用碘值表示，必须不超过20，优选碘值不超过10。如果不饱和程度太高，那么包封率降低，并且脂质体容易氧化，难以加热灭菌。

本发明所使用的中性磷脂是中性甘油磷脂，例如，部分或完全氢化的天然存在的，例如大豆或蛋黄衍生物，或合成的磷脂酰胆碱，部分半合成或合成的二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)或二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)。

制备本发明脂质体膜的另一必要组分是包含基本饱和脂肪酸基的带电磷脂。通常，在脂肪酸基中碳原子的数目至少为14，优选至少为15，并且更优选至少为16。如果脂肪酸基中碳原子的数目小于14，那么脂质体容纳内水相的能力降低并且给予后，脂质体在血中的稳定性降低。

另一方面，如果脂肪酸基中碳原子的数目为28或更大，那么生物相容性降低，并且在生产脂质体期间，需要很高的温度。术语“基本饱和的”指所用脂肪酸是完全饱和的(不含c-c双键)，或脂肪酸的不饱和程度很低。因为脂肪酸基是基本上不饱和的，所以，整个带电磷脂的不饱合程度，用碘值表示，必须不超过20，并优选碘值不超过10。如果不饱合程度太高，那么包封率降低，并且脂质体容易氧化，难以加热灭菌。