[发明专利]新型葡激酶及其生产方法

权利要求书

1.一种编码新型葡激酶的DNA序列，其特征在于该DNA序列与来源于金黄色葡萄球菌的Sφ-C噬菌体DNA的葡激酶DNA序列相比，第109位的腺苷酸发生了变异。

2.根据权利要求1所述的编码新型葡激酶的DNA序列，其特征在于该DNA序列的第109位腺苷酸变异为鸟苷酸。

3.根据权利要求2所述的编码新型葡激酶的DNA序列，其特征在于该DNA序列来源于溶源性金黄色葡萄球菌的染色体DNA。

4.根据权利要求3所述的编码新型葡激酶的DNA序列，其特征在于该DNA序列来源于溶源性金黄色葡萄球菌FRI610A的染色体DNA。

5.一种重组表达载体，其特征在于该重组表达载体含有权利要求1、2、3或4所述的编码新型葡激酶的DNA序列。

6.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于该重组表达载体的载体为质粒。

7.根据权利要求6所述的重组表达载体，其特征在于质粒为pBV220。

8.一种重组细胞，其特征在于该重组细胞的宿主细胞被权利要求5、6或7所述的重组表达载体所转化。

9.根据权利要求8所述的重组细胞，其特征在于宿主细胞为原核细胞。

10.根据权利要求9所述的重组细胞，其特征在于宿主细胞为大肠杆菌

11.根据权利要求10所述的重组细胞，其特征在于宿主细胞为大肠杆菌HB101。

12.一种编码新型葡激酶的氨基酸序列，其特征在于该氨基酸序列由权利要求1、2、3或4所述的DNA序列所编码。

13.根据权利要求12所述的新型葡激酶的氨基酸序列，其特征在于该氨基酸序列与来源于金黄色葡萄球菌的Sφ-C噬菌体DNA的葡激酶DNA序列所编码的氨基酸序列相比，第36位的精氨酸发生了变异。

14.根据权利要求13所述的新型葡激酶的氨基酸序列，其特征在于该氨基酸序列的第36位氨基酸为甘氨酸。

15.一种生产如权利要求12、13或14所述新型葡激酶的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)提取含有如权利要求1、2、3或4所述的新型葡激酶DNA序列的染色体DNA；(2)以步骤(1)所得到的新型葡激酶DNA序列为模板的PCR扩增；(3)如权利要求5、6或7所述表达载体的构建；(4)如权利要求8、9、10或11所述的重组细胞的构建；(5)步骤(4)所获得的重组细胞的培养表达；(6)步骤(5)所获得的表达产物的分离纯化；(7)步骤(6)所获得的纯化产物的氨基酸序列的分析及生物活性的测定。