[发明专利]基因工程浮萍

权利要求书

1.用目的核苷酸序列转化浮萍的方法，其中所述核苷酸序列包含至少一个表达盒，所述表达盒包含一个赋予对选择剂抗性的基因，所述方法包括以下步骤：

(a)提供浮萍组织靶，所述浮萍组织的细胞包括细胞壁；和

(b)以足以穿透细胞壁并将所述核苷酸序列沉积在所述组织的细

   胞内的速度，将所述核苷酸序列发射至所述浮萍组织靶，藉

   此产生转化的组织，

其中所述核苷酸序列由微弹携带；并且其中通过将所述微弹发射至所述组织，而将所述核苷酸发射至所述组织。

2.按照权利要求1的方法，还包括用所述选择剂培养转化的组织的步骤。

3.按照权利要求2的方法，还包括再生转化的浮萍植株的步骤。

4.按照权利要求1的方法，其中所述组织是愈伤组织。

5.按照权利要求1的方法，其中所述组织是分生组织。

6.按照权利要求1的方法，其中所述组织是叶组织。

7.按照权利要求1的方法，其中所述浮萍组织选自Spirodela、Wolffia、Wolfiella和浮萍属。

8.按照权利要求1的方法，其中所述浮萍组织选自青萍、Lemnaminiscula和Lemna gibba的一个物种。

9.按照权利要求1的方法，其中所述微弹包括金属粒子。

10.按照权利要求1的方法，其中所述微弹包括直径为约0.5微米至约3微米的金属粒子。

11.按照权利要求1的方法，其中提供许多微弹，每个微弹均具有固定其中的所述核苷酸序列，并且每个微弹均被发射至植物组织靶上。

12.按照权利要求1的方法，其中所述核苷酸序列编码选自以下的一种蛋白或肽：胰岛素、生长激素、α-干扰素、β-葡萄糖脑苷脂酶、成视网膜细胞瘤蛋白、p53蛋白、制管张素、leptin和血清白蛋白。

13.按照权利要求1的方法，其中所述核苷酸序列编码一种多体蛋白的至少一个蛋白或肽亚基。

14.用目的核苷酸序列转化浮萍的方法，所述方法包括以下步骤

(a)用包含一种载体的农杆菌接种浮萍植物组织，所述载体包含

   所述核苷酸序列，其中所述核苷酸序列包含至少一个表达

   盒，而所述表达盒包含一种赋予对选择剂抗性的基因；和

(b)将所述组织与农杆菌协同培养，以产生转化的组织。

15.按照权利要求14的方法，还包括在包含足以抑制农杆菌生长的抗生素的培养基中，培养所述转化组织的步骤。

16.按照权利要求14的方法，还包括在包含所述选择剂的培养基中培养所述转化组织的步骤。

17.按照权利要求16的方法，还包括从所述转化组织再生转化浮萍植株的步骤。

18.按照权利要求14的方法，其中所述组织是愈伤组织。

19.按照权利要求14的方法，其中所述组织是分生组织。

20.按照权利要求14的方法，其中所述组织是叶组织。

21.按照权利要求14的方法，其中所述浮萍组织选自Spirodela、Wolffia、Wolfiella和浮萍属。

22.按照权利要求14的方法，其中所述浮萍组织选自浮萍属。

23.按照权利要求14的方法，其中所述浮萍组织选自青萍、Lemna miniscula和Lemna gibba的一个物种。

24.按照权利要求14的方法，其中所述农杆菌是根癌农杆菌。

25.按照权利要求14的方法，其中所述农杆菌是毛根农杆菌。

26.按照权利要求14的方法，其中所述载体是超级双载体。

27.按照权利要求14的方法，其中所述载体是C58衍生载体。