[发明专利]乙型肝炎病毒核心基因和前S1区基因转染的小鼠靶细胞系及其应用无效
| 申请号： | 00103431.6 | 申请日： | 2000-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN1117858C | 公开（公告）日： | 2003-08-13 |
| 发明（设计）人： | 赵阳青;詹美云 | 申请（专利权）人： | 中国预防医学科学院病毒学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/63;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京三高永信专利代理有限责任公司 | 代理人： | 姚宝琴 |
| 地址： | 100052 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学领域，涉及乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因转染而成的小鼠靶细胞系P99-815的建立，是乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均来源于含双拷贝的首尾相连的HBV-DNAayw亚型的质粒pTHBV-1，乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是从已构建成功的原核表达载体pET-11dCS1切下后，再与真核表达载体pCDNA3构建成pCDNA3CS1质粒，再将该质粒转染小鼠肥大细胞瘤细胞P815，要解决目的基因的分离、连接、克隆、鉴定、构建含目的基因的真核表达载体、转染真核细胞P815的技术，表达外源基因细胞的筛选、克隆、以及保存条件的研究等。该细胞系可以用于治疗和预防乙型肝炎药物的评价，对诱导小鼠体内细胞免疫水平检测时，用此细胞作为靶细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 乙型肝炎 病毒 核心 基因 s1 转染 小鼠 靶细胞 及其 应用 | ||
【主权项】：
1、一种乙型肝炎病毒核心基因编码1-144aa基因和前S1基因编码1-42aa基因转染小鼠P815细胞后获得的靶细胞系P99-815，其特征是：乙型肝炎病毒核心基因和前S1基因均来源于含双拷贝的首尾相连的HBV-DNAayw亚型的质粒pTHBV-1，乙型肝炎病毒核心基因片段和前S1基因片段是从已构建成功的原核表达载体pET-11dCS1切下后，再与真核表达载体pCDNA3构建成pCDNA3CS1质粒，再将该质粒转染小鼠肥大细胞瘤细胞P815，通过G418筛选获得表达外源基因的细胞系。
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