[发明专利]有效的多重检测丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺损病毒(HIV)的寡核苷酸引物及其使用方法无效
| 申请号： | 00104630.6 | 申请日： | 2000-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN1268575A | 公开（公告）日： | 2000-10-04 |
| 发明（设计）人： | K·M·戈曼;D·R·帕特森;J·M·林南;K·宋 | 申请（专利权）人： | 奥索临床诊断有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N33/576 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 吴大建 |
| 地址： | 美国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明公开了用于同时检测人生物样本中的丙型肝炎病毒和人免疫缺损病毒的方法和试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 有效 多重 检测 肝炎 病毒 hcv 免疫 缺损 hiv 寡核苷酸 引物 及其 使用方法 | ||
【主权项】：
1.一种共检测生物样本中的丙型肝炎病毒(HCV)RNA和人免疫缺损病毒(HIV)RNA的方法，该方法包括：(A)用来源于上述样本的RNA作为模板、并用至少一种引发从HCVRNA的DNA逆转录的逆转录引物和至少一种引发从HIVRNA的DNA逆转录的逆转录引物进行逆转录反应，以产生逆转录产物，该产物包括(a)HCV特异性逆转录产物，(b)HIV特异性逆转录产物，或(c)包括(a)和(b)的组合；(B)用一对或多对对HCV的5‘非编码区特异的寡核苷酸引物和一对或多对对HIV特异的寡核苷酸引物对上述逆转录产物进行扩增，以产生扩增产物，该扩增产物包括(a)HCV特异性扩增产物，(b)HIV特异性扩增产物，或(c)(a)和(b)的组合；其中上述每一对对HCV特异的寡核苷酸引物包括：(i)正向引物5’-GGGAGAGCCATAGTGGTCTGCGGAA-3’(C131F25)，和(ii)反向引物5’-CGGGGCACTCGCAAGCACCCTATCA-3’(C294R25)；其中每一对对HIV-1特异的寡核苷酸引物包括如下序列的正向引物：5’-CTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGA-3’(JBLTR4)，和选自下列的对HIV-1特异的反向引物：(1)5’-GGGTCTGAGGGATCTCTAGTTACCAGAGT-3’(JBLTR6)，和(2)5’-TGTTCGGGCGCCACTGCTAGAGA-3’(JBLTR8)，其中每一对对HIV-2特异的寡核苷酸引物包括：序列为5’-GGGAGGTTCTCTCCAGCACTAGCA-3’(2LTRe)的正向引物，和对HIV-2特异、序列为5’-GCGACTAGGAGAGATGGGAACACACA-3’(2LTR-R1)的反向引物；和(C)检测上述扩增产物；其中对HCV-特异性扩增产物的检出表明上述样本中存在HCVRNA，对HTV-特异性扩增产物的检出表明上述样本中存在HIVRNA，对HCV-特异性扩增产物和HIV-特异性扩增产物的检出表明上述样本中存在HCVRNA和HIVRNA。
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