[发明专利]一种海产小杂鱼提取物的制备方法

摘要

本发明提供一种以海产小杂鱼为原料提取多肽混合物制品的制备方法，包括蛋白酶酶解、超滤、离子交换分离、以及洗脱、浓缩、沉淀、混合等工艺步骤，本发明所得提取物的总蛋白质含量大于75％，其中游离氨基酸含量大于15％，所含的多肽混合物分子量小于50kDa，多肽含量大于50％，这种方法制备的多肽混合物可用作营养保健食品和贫血治疗药品。本发明能实现对资源大、成本低廉的海产小杂鱼的科学深加工，产品经济价值高，适于工业化生产。

主权项

1.一种海产小杂鱼提取物的制作方法，其特征在于采用以下步骤制作：(1)将新鲜海产小杂鱼的鱼肉制成鱼糜，取一份鱼糜，按比例加入1～5倍重量的去离子水，搅拌均匀升温至50～70℃，再按鱼肉重0.5～3.0％的比例加入木瓜蛋白酶，保温1～5小时后迅速升温至90～100℃并维持若干分钟；(2)将上述反应完毕的混合物离心，取离心液再用中速滤纸压滤，收集滤液，用截取分子量为10kDa～50kDa的超滤膜分离滤过，收集其滤过部分；(3)在上述滤过部分的液体之中加入混合磷酸盐，调节溶液为pH6～8的缓冲体系，溶液中磷酸盐的浓度为0.01～0.1M，按每升液体1.5～2.5公斤的剂量加入阴离子交换树脂，于室温下间歇搅拌0.5～3小时，然后离心，得离心液A，再按每公斤树脂300～500毫升的剂量加入0.01～0.1M，pH6～8的磷酸盐缓冲溶液，与树脂混合搅拌0.5～1小时后离心，得离心液B；(4)将A与B混合，真空减压浓缩至原体积的1/5～1/7，将浓缩液冷却至5～10℃，再加入3～5倍浓缩液体积的冷丙酮，快速搅拌，然后静置30～120分钟，离心，取沉淀物于真空-10℃～30℃温度下干燥，得浅黄色粉末状固体I；(5)在上述离心后的树脂中按每公斤树脂0.5～1.0升的剂量加入含有0.1～0.4M的NaCl，并调pH值为2～7的洗脱液，室温下缓慢搅拌1～5小时，然后离心，得离心液C，再用按每公斤树脂300～500毫升的剂量加入上述洗脱液，与树脂混合搅拌0.5～1小时后离心，得离心液D；(6)将C和D混合，真空减压浓缩至原体积的1/8～1/10，将浓缩液冷却至5～10℃，过滤除去所析出的盐晶体，滤液继续浓缩至原体积的1/12～1/15，再冷却至5～10℃并过滤除去所析出的盐晶体，然后按V2∶V1＝3～5的体积加入冷丙酮，快速搅拌混匀后静置30～120分钟，然后于4000转/分离心，取沉淀于真空-10℃～30℃温度下干燥，得浅黄色粉末状固体II；(7)将固体I和固体II混合均匀即得。