[发明专利]用于检测磷酸基－N－乙酰胞壁酰五肽移位酶活性的测定方法无效
| 申请号： | 00806590.X | 申请日： | 2000-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN1157484C | 公开（公告）日： | 2004-07-14 |
| 发明（设计）人： | K·达斯;J·拉马查德兰 | 申请（专利权）人： | 阿斯特拉曾尼卡有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 罗宏;姜建成 |
| 地址： | 瑞典南*** | 国省代码： | 瑞典;SE |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测磷酸基-N-乙酰胞壁酰五肽移位酶的酶活性的测定方法，其包含下列步骤：(1)培养反应混合物，其包含，在含水介质中，N-琥珀酰亚胺基[2，3-3H]丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽，N-琥珀酰亚胺基丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽(非-放射性的)，二价金属离子源，十一异戊二烯基磷酸酯源，去污剂和移位酶源，在适于酶活性发生的条件下；(2)在pH～42，用含季铵盐的适当缓冲液酸化反应混合物，以终止步骤(1)的酶反应；(3)提取所形成的任一十一异戊烯醇-焦磷酸酯-[2，3-3H]丙酸酯-N-乙酰胞壁酰五肽产物，并使用闪烁计数器测量放射性，且提供在其中使用的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 检测 磷酸 乙酰 胞壁酰五肽 移位 活性 测定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测磷酸基-N-乙酰胞壁酰五肽移位酶的酶活性的测定方法，其包含下列步骤：(1)在适于酶活性发生的条件下培养反应混合物，其包含，在含水介质中，N-琥珀酰亚胺基[2，3-3H]丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽，N-琥珀酰亚胺基丙酸酯取代的UDP-MurNAc-五肽(非-放射性的)，二价金属离子源，十一异戊二烯基磷酸酯源，去污剂和移位酶源；(2)在PH～4.2，用含季铵盐的适当缓冲液酸化反应混合物，以终止步骤(1)的酶反应；和(3)提取所形成的任一十一异戊烯醇-焦磷酸酯-[2，3-3H]丙酸酯-N-乙酰胞壁酰五肽产物，并使用闪烁计数器测量放射性。
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