[发明专利]使用昆虫细胞制备的人乳铁蛋白及其制备方法无效
申请号: | 00810913.3 | 申请日: | 2000-07-26 |
公开(公告)号: | CN1365390A | 公开(公告)日: | 2002-08-21 |
发明(设计)人: | 李运万;常云喜;郭常喜 | 申请(专利权)人: | 数位生物技术株式会社;韩晟化学株式会社 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12 |
代理公司: | 隆天国际专利商标代理有限公司 | 代理人: | 黄韧敏,杨淑媛 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 制备工艺包括在载体(pBacPAK)中合成转移载体和再混合质粒调节多角体蛋白启动子,乳铁蛋白基因制备重组表达载体(pBacLf)(3);在培养基介质中的昆虫细胞借助载体(pBacPAK)(6)共转移重组揭示载体制备重组昆虫细胞(Sf-Lf)(6),从重组昆虫细胞制备重组昆虫病毒;从重组昆虫细胞制备人乳铁传递蛋白;本发明的重组人乳铁蛋白的生物检验方法是观察在从重组昆虫细胞提取重组人类乳铁传递蛋白并将它和致病细菌如洋葱假单胞菌,恶臭假单胞菌,荧光假单胞菌,鼠伤寒沙门氏菌,大肠杆菌混合后,杀灭致病细菌的速率。 | ||
搜索关键词: | 使用 昆虫 细胞 制备 铁蛋白 及其 方法 | ||
【主权项】:
1.一种通过使用昆虫细胞来制备人乳铁蛋白的方法,包括下列步骤:(a)将转移载体(1)和重组质粒phLf-8(2)结合以制备重组表达载体pBacLf(3),该重组表达载体用载体pBacPAK中的多角体蛋白启动子修饰以实现对乳铁蛋白基因的调节;(b)在培养基中将所述重组表达载体与一帮助载体pBacPAK6(4)共转染进入昆虫细胞Sf9(5)以制备重组昆虫细胞Sf-Lf(6),并从所述重组昆虫细胞中制备重组昆虫病毒;以及(c)从所述重组昆虫细胞Sf-Lf(6)中制备人乳铁蛋白。
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