[发明专利]具有遗传相似性的片段的积累无效
申请号: | 00814836.8 | 申请日: | 2000-10-18 |
公开(公告)号: | CN1382222A | 公开(公告)日: | 2002-11-27 |
发明(设计)人: | 斯特劳恩·格兰特;索瑞英尼·布洛恩戴尔 | 申请(专利权)人: | 解码遗传EHF公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 过晓东 |
地址: | 冰岛雷*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 公开了鉴定含有在两种个体之间具有遗传相似性的DNA的DNA片段的方法。这些方法包括步骤各从两个个体获取基因组DNA样品;将基因组DNA样品与限制性内切酶接触;将一个DNA样品甲基化;将甲基化的DNA样品与未甲基化的DNA样品混合,在变性条件下,温育DNA样品混合物;另外,在允许再退火DNA样品形成含有同源杂合体DNA片段和异源杂合体DNA片段的混合物的条件下温育DNA样品混合物;将混合物与消化同源杂合体DNA片段的限制性内切酶接触;将混合物与裂解含有错配的异源杂合体DNA片段的两条链的内切酶接触,形成含有富在两个个体之间具有遗传相似性的DNA片段的完全匹配的异源杂合体DNA片段的DNA样品混合物。 | ||
搜索关键词: | 具有 遗传 相似性 片段 积累 | ||
【主权项】:
1.鉴定完全匹配的异源杂合体DNA片段的方法,这些片段包括两个个体之间具有遗传相似性的DNA,方法包括步骤:a)各从两个个体获取基因组DNA样品,从而提供第一个基因组DNA样品和第二个基因组DNA样品。b)将第一个和第二个基因组DNA样品与限制性内切酶接触,从而分别形成第一个和第二个初步消化的DNA样品;c)甲基化初步消化的DNA样品,从而形成甲基化的初步消化DNA样品;d)将甲基化的初步消化DNA样品和第二个初步消化的DNA样品混合,形成DNA样品混合物;e)在允许变性DNA样品的条件下温育DNA样品混合物,从而形成变性的DNA样品混合物;f)在允许再退火DNA样品的条件下温育变性的DNA样品混合物,从而形成含有同源杂合体DNA片段和异源DNA片段的退火DNA样品混合物;g)将退火的DNA样品混合物与限制性内切酶接触,消化同源杂合体DNA片段,从而形成同源杂合体-消化的,退火DNA样品混合物;和h)将同源杂合体-已消化的,退火DNA样品混合物与内切酶接触,裂解含有错配的异源杂合体DNA片段的两条链,从而形成含有完全匹配的异源杂合体DNA片段的错配已消化的DNA样品混合物。其中,完全匹配的异源杂合体DNA片段含有两个个体之间具有遗传相似性的DNA片段。
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