[发明专利]一组生产用哺乳类细胞人源抗体高效表达载体

摘要

一组生产用哺乳类细胞人源抗体高效表达载体，包括12种由不同元件定向组合而成的载体，其主要特征由真核细胞表达元件包括强启动子EF-1α、来源于人类基因组DNA或信使RNA的抗体分子轻、重链恒定区基因、内在核糖体识别位点及二氢叶酸还原酶基因的不同形式的定向组合而成，可被用来克隆抗体可变区或Fab基因，导入中华地鼠卵巢(CHO)细胞后获得不同来源抗体基因的永久性高效表达。其用途在于可被用来持续规模生产全人IgG抗体或人-鼠嵌合抗体制剂而用于临床治疗。

主权项

1.一种用于在哺乳类细胞中生产人源抗体的高效表达系统，是由重链表达载体和轻链表达载体组成，重链表达载体含有重链表达盒1，轻链表达载体含有轻链表达盒1，当所述重链表达载体和所述轻链表达载体同时转化哺乳类细胞时，能够表达出人源全抗体；其中，重链表达盒1的组成依次为启动子EF-1α，抗体基因先导序列，重链可变区基因(VH)的克隆位点BssHII和BstEII，来自人淋巴细胞基因组DNA的包括内含子在内的IgG基因重链全长恒定区基因，牛生长因子多聚腺苷酸尾(BGH Poly A)，SV40病毒转录起始子和启动子(SV40 ori)，二氢叶酸还原酶基因(DHFR)及SV40转录终止信号(SV40 polyA)；轻链表达盒1的组成依次为启动子EF-1α，抗体基因先导序列，轻链可变区基因(VL)的克隆位点EcoRV和XhoI，来自人淋巴细胞基因组DNA的包括内含子在内的IgG基因轻链全长恒定区基因及其转录终止信号，SV40病毒转录起始子和启动子(SV40 ori)，二氢叶酸还原酶基因(DHFR)及SV40转录终止信号(SV40 poly A)。