[发明专利]一种高分辨率单碱基突变检测的杂交方法及其应用有效
| 申请号： | 01105267.8 | 申请日： | 2001-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN1151272C | 公开（公告）日： | 2004-05-26 |
| 发明（设计）人： | 赵建龙;景奉香;孙悦;张为;徐元森 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海冶金研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 费开逵 |
| 地址： | 200050*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种寡核苷酸杂交方法，探针长度相同，以玻璃等无机载体为固定载体。使用烷基季铵盐氯化四甲铵(TMACL)杂交体系，杂交液为按终浓度0.01M pH6.8磷酸钠、1mM pH7.6 EDTA、0.5％SDS、100μg/ml鱼精DNA、5×Denhardt溶液，0.5-1.5M TMACL，洗涤液配方按终浓度0.2％SDS，50mMpH8.0 Tris-HCl，TMACL浓度与杂交液中相同，杂交温度低于Ti值5-10℃，洗涤温度低于杂交温度5-10℃。本发明提供的杂交方法适用于相同长度，不同G+C或A+T含量的寡核苷酸芯片，具有芯片设计简单，单碱基分辨清晰的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高分辨率 碱基 突变 检测 杂交 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种寡核苷酸杂交方法，使用烷基季铵盐氯化四甲铵(TMACL)杂交体系，包括：(1)寡核苷酸探针的设计，准备；(2)目的片断与杂交液混合； (3)杂交；(4)洗涤，凉干；(5)信号分析；其特征在于杂交液为按终浓度0.01M PH6.8磷酸钠、1mM PH7.6 EDTA、0.5％SDS、100μg/ml鱼精DNA、5×Denhardt溶液，0.5-1.5M TMACL。
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