[发明专利]孕前基因报警诊断试剂盒及其检测方法

摘要

本发明为孕前基因报警诊断试剂盒及其检测方法，包括提取受检者DNA模板的DNA提取液，用来扩增受检者基因组DNA上特异片段的PCR混合液，DNA聚合酶，PCR产物酶切混合液，限制性内切酶，以及纯合突变的阳性对照模板和用以PCR反应的联管。所说的报警基因包括N⁵，N¹⁰-亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合酶还原酶基因，其突变位点分别为677胞嘧啶→胸腺嘧啶和66腺嘌呤→鸟嘌呤，其引物序列分别为5’-TGA AGG AGA AGG TGT CTG CGG GA-3’，5’-AGG ACG GTG CGG TGA GAG TG-3’，5’-GCA AAG GCCATC GCA GAA GAC AT-3’，5’-GTG AAG ATC TGC AGA AAA TCCATG TA-3’。可在孕前诊断子代是否发生神经管畸形。

主权项

1、一种孕前基因报警诊断试剂盒，包括提取受检者DNA模板的DNA模板提取液，用来扩增受检者基因组DNA上特异片段的PCR反应混合液，DNA聚合酶，PCR产物酶切反应混合液，限制性内切酶以及纯合突变的阳性对照模板和用以进行PCR反应的联管，其特征在于报警基因包括N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶mthfr和甲硫氨酸合酶还原酶mtrr，N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶mthfr基因的突变位点是677胞嘧啶→胸腺嘧啶和甲硫氨酸合酶还原酶mtrr基因的突变位点是66腺嘌呤→鸟嘌呤，其引物序列分别为5’-TGA AGG AGA AGG TGT CTGCGG GA-3’，5’-AGG ACG GTG CGG TGA GAG TG-3’和5’-GCAAAG GCC ATC GCA GAA GAC AT-3’，5’-GTG AAG ATC TGCAGA AAA TCC ATG TA-3’。