[发明专利]一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法无效
| 申请号： | 01118134.6 | 申请日： | 2001-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN1139661C | 公开（公告）日： | 2004-02-25 |
| 发明（设计）人： | 马占芳;隋森芳 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京清亦华专利事务所 | 代理人： | 罗文群 |
| 地址： | 1000*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法，首先制备成纳米金颗粒的生物探针1，用与待检测的DNA分子互补的巯基DNA或配体分子制备探针2，然后使待检测的DNA分子或者待检测的蛋白受体分子结合在探针2上，再使纳米金颗粒固定在检测仪器的样品台表面，最后使用扩增试剂对纳米金颗粒进行原位多次扩增，即可进行对生物分子的检测。本发明方法具有检测灵敏度高、操作简便、快速等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 纳米 颗粒 原位 多次 扩增 检测 生物 分子 方法 | ||
【主权项】：
1、一种纳米金颗粒原位多次扩增检测生物分子的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将颗粒度小于30nm的金颗粒水溶液与浓度大于0.01μg/mL、pH值为5～9的巯基DNA缓冲溶液，按照金颗粒与巯基DNA的摩尔比为1∶1-1000的比例，在20-60℃的条件下混合，时间大于30分钟，制备成纳米金颗粒的生物探针1；(2)用与待检测的DNA分子互补的巯基DNA制备探针2：在20-60℃的条件下，用浓度大于0.1μg/mL、pH值为5-9的巯基DNA缓冲溶液，浸泡检测仪器的样品台表面，时间大于2小时，使探针2固定在检测仪器的样品台表面；(3)用pH值为5-9的待检测的DNA分子缓冲溶液，在20-60℃的条件下，浸泡已经固定了探针2的检测仪器的样品台表面，时间大于30分钟，使待检测的DNA分子结合在探针2上；(4)在20-60℃的条件下，用纳米金颗粒的生物探针1浸泡检测仪器的样品台表面，时间大于30分钟，使纳米金颗粒固定在检测仪器的样品台表面；(5)利用浓度大于0.001％的氯金酸水溶液或pH值为4-9的氯金酸缓冲溶液以及浓度大于0.01mmol/L的羟胺水溶液或羟胺缓冲溶液作为扩增试剂，对固定在检测仪器的样品台表面上的纳米金颗粒进行原位多次扩增，使纳米金颗粒的尺寸增大，每次扩增时间大于0.5分钟，即可进行对生物分子的检测。
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