[发明专利]一种在真核细胞中高效表达重组人白细胞介素12的方法有效
申请号: | 01126923.5 | 申请日: | 2001-09-29 |
公开(公告)号: | CN1141319C | 公开(公告)日: | 2004-03-10 |
发明(设计)人: | 万国光;李春澍 | 申请(专利权)人: | 上海中信国健药业有限公司 |
主分类号: | C07K14/54 | 分类号: | C07K14/54;C12N15/24 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 徐迅 |
地址: | 201203上海市浦东南*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种生产重组人IL-12的方法,该方法包括:a)提供对应于具有第一信号肽的P35亚基的核苷酸序列和对应于P40亚基的核苷酸序列;b)将步骤a)所述核苷酸序列插入表达载体中;c)用步骤b)获得的表达载体转化真核细胞;d)在适合重组人IL-12表达的条件下,培养步骤c)所得的转染的真核细胞。该方法通过提高P35亚基的表达强度使P35和P40两个亚基的表达量得到了平衡,从而提高了具有生物活性的IL-12的表达量。 | ||
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【主权项】:
1.一种生产重组人白细胞介素-12的方法,该方法包括:a)提供对应于P35亚基的核苷酸序列和对应于P40亚基的核苷酸序列,其中所述P35亚基具有完整的第一信号肽;b)将步骤a)所述核苷酸序列分别插入表达载体中;c)用步骤b)获得的表达载体转化真核细胞;d)在适合重组人IL-12表达的条件下,培养步骤c)所得的转染的真核细胞;e)从培养物中分离纯化得到白细胞介素-12。
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