[发明专利]中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹PCR／RFLP分子鉴定方法及试剂盒无效
| 申请号： | 01127215.5 | 申请日： | 2001-09-14 |
| 公开（公告）号： | CN1128226C | 公开（公告）日： | 2003-11-19 |
| 发明（设计）人： | 周开亚;孙红英;杨光 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | C12Q1/25 | 分类号： | C12Q1/25;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 | 代理人： | 栗仲平 |
| 地址： | 210097 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及水产养殖中河蟹苗种和种蟹鉴定的技术领域，是一种用于鉴别中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹的PCR/RFLP分子鉴定方法及该方法所使用的试剂盒。鉴定方法包括聚合酶链反应、限制性酶切反应和电泳检测。试剂盒中包括一对聚合酶链反应引物、一种DNA限制性内切酶和标准图谱。本发明的优点在于：本发明可解决水产养殖中河蟹苗种和种蟹鉴定的难题，提供一种准确鉴别中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹的分子鉴定试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 中华 绒螯蟹 合浦 pcr rflp 分子 鉴定 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1、对蟹苗或成蟹进行PCR/RFLP分子鉴定的方法是采用下列步骤：a、DNA的提取：按常规进行，用无离子水将受试样品DNA的浓度调节至0.1-0.3μg/μL；b、扩增DNA片段，即进行聚合酶链反应，用于聚合酶链反应的1对引物的DNA序列为：IHX01-L：5’GGGTAACTGAGCAAAGGTAGCATAAT??3’IHX01-H：5’GAAAGAAGATAGAGGTCGCAAACT??3’；c、加入限制性内切酶DraI进行酶切，进行酶切的限制性内切酶的酶切位点为：d、电泳；e、与标准图谱对比：如具有293bp酶切片段，则受试样品为中华绒螯蟹；如具有188bp酶切片段，则受试样品为合浦绒螯蟹。
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