[发明专利]赤魟肿瘤抑制基因的克隆、表达及生物活性无效
| 申请号： | 01136939.6 | 申请日： | 2001-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN1428347A | 公开（公告）日： | 2003-07-09 |
| 发明（设计）人： | 徐安龙;涂洪斌;熊茜 | 申请（专利权）人： | 北京博奥环宇生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07H21/04 | 分类号： | C07H21/04;C07K14/435;C12P19/34;C12P21/02;C12N15/64;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 龙淳 |
| 地址： | 100012 北京市朝阳区亚运*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明通过构建赤魟(Dasytisakajei)尾刺cDNA文库和DNA测序，并根据所获得的IPL肿瘤抑制基因EST3’端和载体核苷酸序列，设计引物，用PCR的方法，从赤魟尾刺cDNA文库中筛选克隆到IPL全长基因。新基因长度为849bp，编码136个氨基酸的成熟肽(序列号码1)。所表达的蛋白质等电点为9.68，分子量约为15,690道尔顿。将赤魟尾刺IPL基因克隆于硫氧还蛋白基因融合表达载体pTRX的trxA基因3’末端，构建符合读码框的融合基因，该融合蛋白在大肠杆菌中以胞内部分可溶的形式存在，表达量可达40～60mg/l。通过Ni－Chelating亲和色谱层析，蛋白酶3C切割和凝胶过滤，得到纯度在95％以上成熟的重组赤魟肿瘤抑制蛋白，得率为5～8mg/l。该蛋白具有抑制选择性杀伤肿瘤细胞生长的活性。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 抑制 基因 克隆 表达 生物 活性 | ||
【主权项】：
1.一种如序列表中序列号码1所示核苷酸序列的DNA。
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