[发明专利]利用固相载体从生物粒子中分离核酸的方法有效
申请号: | 01140445.0 | 申请日: | 2001-12-07 |
公开(公告)号: | CN1355319A | 公开(公告)日: | 2002-06-26 |
发明(设计)人: | 张旭;谢欣;陈继明;陈德朴;费维扬;程京 | 申请(专利权)人: | 清华大学;北京博奥生物芯片有限责任公司 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C07H21/00 |
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地址: | 100084 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 利用固相载体从生物粒子中分离核酸的方法属于生物粒子快速分离技术领域,其特征在于它用纳米磁性微球悬浮液或经特别处理的纤维膜作固相吸附介质来分离生物粒子中的细胞,再用细胞裂解液裂解细胞结构,通过固相吸附和解吸附以便直接从全血、血浆、唾液、尿液、细胞和组织培养液等生物样品中富集含有核酸的白细胞、病毒粒子、上皮细胞、培养细胞等的生物粒子,并获取核酸。这种方法简便快速,可用于各种不同规模和品种的样品制备,而且易于实现自动化、微型化装置的构建。 | ||
搜索关键词: | 利用 载体 生物 粒子 分离 核酸 方法 | ||
【主权项】:
1.一种利用固相载体从生物粒子中分离核酸的方法,依次包含分离并裂解生物粒子的细胞结构并从中分离出核酸的步骤,其特征在于,它依次含有以下步骤:(1)在生物样品中加入可物理吸附含有核酸的细胞的固相吸附介质,它是一种悬浮状的粒径范围为5~10000nm且经有机包覆的纳米磁性微球,使它们旋转混匀后静置;(2)分离出上述固相吸附介质,弃去上清液,用缓冲液洗涤;(3)加入细胞裂解液使其和固相吸附介质旋转混匀并静置后结合缓冲液使细胞裂解;(4)用洗脱缓冲液洗涤上述固相吸附介质,获得上述固相吸附介质——核酸的复合物;(5)回收含有核酸的洗脱缓冲液并分离出核酸。
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