[发明专利]高效表达重组水蛭素及其生产方法有效
申请号: | 01141415.4 | 申请日: | 2001-09-24 |
公开(公告)号: | CN1420176A | 公开(公告)日: | 2003-05-28 |
发明(设计)人: | 赵凯;吴祖泽;苑宾;张津辉;李满文;熊志红;蒋中华;董春娜;曹菊荣;于爱平 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所;北京鲁银利华医药科技发展有限公司 |
主分类号: | C12N15/15 | 分类号: | C12N15/15;C12N15/63;C12N15/64;C07K14/815 |
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地址: | 100850 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种生物工程的抗栓药物及其生产方法,具体而言是涉及一种新型水蛭素及其生产方法。采用全人工合成的方法获得变异的HV2全基因,在其5’端上游加入一段合适前导序列。构建毕赤酵母分泌型表达载体pHV2,载体转化宿主细胞GS115,并整合入宿主细胞的染色体中。筛选高效表达菌株,经优化发酵诱导、分离纯化步骤,提高了重组基因产物的生产效率,产物表达水平和生物学活性,以及对抗凝、抗栓的药效学研究表明,高于文献报道,这为水蛭素II型的大规模生产和临床应用的深入研究提供了物质来源。 | ||
搜索关键词: | 高效 表达 重组 水蛭 及其 生产 方法 | ||
【主权项】:
1、一种新型编码水蛭素的DNA序列,其特征在于该DNA编码序列与来源于水蛭的天然的水蛭素2型DNA序列相比,该DNA编码序列的第121位核苷酸由胞苷酸变异为鸟苷酸、第156位核苷酸由胸苷酸变异为胞苷酸。其前导序列为CTCGAGAAAAGA。
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