[发明专利]酶法快速定量测定氧化型和还原型谷胱甘肽无效
申请号: | 01802073.9 | 申请日: | 2001-06-20 |
公开(公告)号: | CN1392901A | 公开(公告)日: | 2003-01-22 |
发明(设计)人: | 朴英美;崔恩美;崔真熙;金性勋;白先熙;李上燮 | 申请(专利权)人: | 朴英美 |
主分类号: | C12Q1/26 | 分类号: | C12Q1/26 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 丁业平,王维玉 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及一种方法,通过将GSH诱捕剂处理样品的步骤引入到采用氧化剂和谷胱甘肽还原酶的常规酶法分析中,可同时定量测定氧化型和还原型谷胱甘肽(GSSG·GSH)。用于快速定量测定氧化型和还原型谷胱甘肽的方法包括下列步骤(i)获取组织样品然后制备代谢阻断的组织匀浆;(ii)采用和不用GSH诱捕剂制备等体积的匀浆级分,并将磷酸缓冲液、蒸馏水和NADPH溶液加入到每个级分中;(iii)将谷胱甘肽还原酶和氧化剂加入到每个级分中启动反应;和(iv)采用和不用GSH诱捕剂测定含有级分的反应混合物吸光度以分别定量测定氧化型谷胱甘肽(GSSG)和总谷胱甘肽,然后从总谷胱甘肽中减去GSSG量从而确定还原型谷胱甘肽(GSH)的量。根据本发明,氧化型和还原型谷胱甘肽的量能同时以一种简便和准确的方式测定,这使得本发明实际应用在由细胞氧化/还原态异常所引发的疾病的诊断和治疗成为可能。 | ||
搜索关键词: | 快速 定量 测定 氧化 原型 谷胱甘肽 | ||
【主权项】:
1.一种用于快速定量测定氧化型和还原型谷胱甘肽的方法,包括:(i)获取组织样品,然后制备代谢被阻断的组织匀浆;(ii)在采用和不用GSH诱捕剂的情况下制备等体积的匀浆级分,并将磷酸缓冲液、蒸馏水和NADPH溶液加入到每个级分中;(iii)将谷胱甘肽还原酶和氧化剂加入到每个级分中启动反应;和(iv)在采用和不用GSH诱捕剂的情况下测定含有所述级分的反应混合物以分别定量测定氧化型谷胱甘肽(GSSG)和总谷胱甘肽,然后从总谷胱甘肽中减去GSSG量从而确定还原型谷胱甘肽(GSH)的量。
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